| 查看: 436 | 回复: 1 | ||
[求助]
使表达盒在ITS序列的介导下重组到米曲霉基因中什么原理
|
|
最近要合成一个complete cds的α-amylase全基因（GenBank号fj859877），在关于这个基因的相关title中发现这位作者是为了能够将a一淀粉酶表达盒片段转化到米曲霉中,构建了重组载体pBC一hygro-ITS-amy,全长为10.4kb。重组载体中,a一淀粉酶表达盒序列连接到了ITS序列中间,形成了一条融合 序列,载体带有HygromycinB磷酸转移酶表达盒,可以用于筛选米曲霉转化子。 我的问题是:为什么要将α-淀粉酶连接到ITS序列的中间，ITS序列不是鉴定菌种用的吗？并且作者就是从米曲霉中克隆得到了α-淀粉酶表达盒的呢。这是什么原理呢？为了成功表达α-淀粉酶，一定要连接ITS序列融合吗？我的宿主是毕赤酵母，表达载体也是酵母表达载体， 那我是否需要为了成功表达此基因，加α-淀粉酶连接上ITS序列呢？ 此基因在NCBI中http://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/fj859877 显示了信号肽和成熟肽，还有CDS，还有mRNA，我合成全基因是需要合成成熟肽序列就能成功表达了吗（我的毕赤酵母载体上有信号肽序列）？这个基因有9个外显子和8个内含子，只需要合成外显子就够了吗？ 多多指教呢。   |
回复此楼» 猜你喜欢
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有278人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有14人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
2楼2016-01-05 14:31:11
