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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 菌种保存与复活
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零星公寓

新虫 (小有名气)

[求助] 菌种保存与复活 已有5人参与

怎样用甘油法保存菌种呢？具体的步骤是什么？保存后怎样让菌种活化？越详细越好。谢谢各位！

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1楼 2016-01-04 16:05:45
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hcyw0611

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
11楼: Originally posted by 零星公寓 at 2016-01-08 16:18:38
放在－21℃保存可以吗？实验室好像没有－80
...

-20℃可短期保存，如需长期保存得-70℃或-80℃？前面的操作完成的顺利吗？
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13楼2016-01-09 08:30:42
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yun1992503

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
灭菌的30%的甘油，培养至对数期的菌液1：1混匀，至于-80℃保存即可。菌种活化在适宜的固体培养基上划线培养即可。
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心若浮沉 浅笑安然
2楼2016-01-04 20:00:21
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lordsidious

铁杆木虫 (知名作家)

Dark Lord of the Sith
大学微生物实验课本，自己去翻

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May the Force be with you.
3楼2016-01-04 20:24:33
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hcyw0611

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
菌种的保存有多种方法：甘油管冷冻保藏法、真空冷冻干燥法、液氮冷冻保藏法。
甘油管冷冻保藏法的具体步骤（供参考）：
1.配制30%甘油（100%甘油：无菌水=3:7），高压灭菌后备用；
2.取lEP管一只，用接种环无菌刮取菌落若干，涮洗在盛有PBS的EP管中（也可用PBS洗涤培养基上的菌落制成悬液，再吸取悬液置于EP管中）；
3.在盛有菌悬液的EP管中加等量30%甘油；
4.封盖好，作好标记，置于-70℃冻存。
也可以用生理盐水取代PBS。
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4楼2016-01-04 21:20:58
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