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零星公寓

新虫 (小有名气)

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[求助] 菌种保存与复活已有5人参与

怎样用甘油法保存菌种呢？具体的步骤是什么？保存后怎样让菌种活化？越详细越好。谢谢各位！

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1楼 2016-01-04 16:05:45

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hcyw0611

铜虫 (初入文坛)

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专业: 病原细菌、细菌感染与宿主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

菌种的保存有多种方法：甘油管冷冻保藏法、真空冷冻干燥法、液氮冷冻保藏法。
甘油管冷冻保藏法的具体步骤（供参考）：
1.配制30%甘油（100%甘油：无菌水=3:7），高压灭菌后备用；
2.取lEP管一只，用接种环无菌刮取菌落若干，涮洗在盛有PBS的EP管中（也可用PBS洗涤培养基上的菌落制成悬液，再吸取悬液置于EP管中）；
3.在盛有菌悬液的EP管中加等量30%甘油；
4.封盖好，作好标记，置于-70℃冻存。
也可以用生理盐水取代PBS。