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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助：高温可以使RNA降解吗？
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pmay

金虫 (初入文坛)

[交流] 求助：高温可以使RNA降解吗？

我在提取RNA的时候使用了蛋白酶K，灭活蛋白酶的时候是用开水的，同样的材料没有加蛋白酶的时候提的很好，但是加了蛋白酶之后反而降解很严重，另外我从网上看到，蛋白酶有灭活RNA酶的作用，我想来想去，会不会在灭活蛋白酶的时候把RNA给降了阿？请高手指点一下~~
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1楼 2008-09-27 12:57:43
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pmay

金虫 (初入文坛)
我主要是想提FAA固定液中的材料，想知道我固定的材料里面的RNA有没有降，后面要做组织原位杂交。没有加蛋白酶K一点也提不出来，加了提出来的却是降解的，我这两天又提了，没有高温灭活蛋白酶K，结果还是降解的，真的不知道怎么办了。。。
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4楼2008-09-28 22:47:56
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香菱儿

铁杆木虫 (著名写手)
★
pmay(金币+1,VIP+0):谢谢
沸水浴加热会使RNA降解的
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漫洒英雄泪，相离处士家。谢慈悲剃度在莲台下。没缘法转眼分离乍。赤条条来去无牵挂。那里讨烟蓑雨笠卷单行？一任俺芒鞋破钵随缘化！
2楼2008-09-28 08:49:02
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bbcaaa888

铁虫 (小有名气)
★
pmay(金币+1,VIP+0):谢谢
理论上提RNA大多不用蛋白酶K，因为异硫氰酸胍完全能抑制RNA酶的作用，如果你加的蛋白酶k量不多，RNA酶不能完全降解消化，而RNA酶又耐高温，高温灭活蛋白酶k完全可能导致未被消化的RNA酶降解RNA。

[ Last edited by bbcaaa888 on 2008-9-28 at 17:12 ]
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3楼2008-09-28 13:59:37
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香菱儿

铁杆木虫 (著名写手)
是不是FAA固定液中有RNase啊？
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漫洒英雄泪，相离处士家。谢慈悲剃度在莲台下。没缘法转眼分离乍。赤条条来去无牵挂。那里讨烟蓑雨笠卷单行？一任俺芒鞋破钵随缘化！
5楼2008-09-29 08:45:05
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