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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 高分子生物材料 » 共聚焦显微镜中纳米材料的荧光标记问题？
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stonegold

至尊木虫 (知名作家)

铁杆木虫

[求助] 共聚焦显微镜中纳米材料的荧光标记问题？ 已有2人参与

本人合成了一个聚丙烯酸-磷酸钙的复合纳米粒子，并作为基因载体进行基因转染。投稿时，审稿人要求给出共聚焦显微镜的照片，要求纳米粒子和DNA都要用荧光标记，DNA荧光标记的可以买到，可是纳米粒子怎么荧光标记，请各位大侠给点建议。急，先谢谢各位了。
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1楼 2015-12-29 16:34:09
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

liuanan

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ...
感谢参与，应助指数 +1
markar: 金币+2, 鼓励一下！ 2015-12-30 14:43:08
stonegold: 金币+50 2015-12-31 08:49:24
你的纳米材料上有很多羧基，用带氨基的染料分子通过EDC，NHS修饰。选用的染料分子与DNA标记的染料分子不要在同一个波段。
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2楼2015-12-30 03:13:38
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yifeng1206

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
markar: 金币+1, 应助指数+1, 鼓励一下！ 2015-12-30 14:43:18
赞同楼上所说的，在高分子材料上面修饰上荧光分子，比如这个 Cyanine5 NHS ester，然后就可以用共聚焦的633 nm laser 激发来观察
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3楼2015-12-30 09:18:58
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liuanan

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
markar: 金币+1, 应助指数+1, 鼓励一下！ 2015-12-31 09:32:24
Cyanine5 NHS ester不能与羧基反应，另找氨基的染料分子
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4楼2015-12-31 00:37:37
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liuanan

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
markar: 金币+1, 应助指数+1, 鼓励一下！ 2015-12-31 09:32:46
你的DNA是绿光标记的，那你就用蓝光或红光标记纳米材料，比如http://www.fanbobiochemicals.com.cn/product/show-294.html
你的DNA肯定不是GFP标记的，GFP是蛋白，体积太大
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7楼2015-12-31 09:10:36
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liuanan

专家顾问 (著名写手)
Cy3是黄色光，容易与绿光串色。
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11楼2015-12-31 11:12:04
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stonegold

至尊木虫 (知名作家)

铁杆木虫
引用回帖:
2楼: Originally posted by liuanan at 2015-12-30 03:13:38
你的纳米材料上有很多羧基，用带氨基的染料分子通过EDC，NHS修饰。选用的染料分子与DNA标记的染料分子不要在同一个波段。

我使用的DNA是绿色荧光蛋白标记的，麻烦您能不能给出一个具体的染料分子，我对这个实在是没有概念呀，拜托您啦！
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5楼2015-12-31 08:58:51
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stonegold

至尊木虫 (知名作家)

铁杆木虫
引用回帖:
4楼: Originally posted by liuanan at 2015-12-31 00:37:37
Cyanine5 NHS ester不能与羧基反应，另找氨基的染料分子

必须是氨基的，不能是NH3+，对吗？您能不能给点具体建议，我对这个一点头绪也没有，我是个做杂化材料的，原来没有做过这类实验，拜托你啦。
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6楼2015-12-31 09:01:55
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stonegold

至尊木虫 (知名作家)

铁杆木虫
引用回帖:
2楼: Originally posted by liuanan at 2015-12-30 03:13:38
你的纳米材料上有很多羧基，用带氨基的染料分子通过EDC，NHS修饰。选用的染料分子与DNA标记的染料分子不要在同一个波段。

Cy3胺 Cyanine3 amine
Cyanine3 is an fluorophore with free amino group (amino-dye). It can be conjugated with NHS esters, carboxy groups (after activation), and epoxides.

文章链接：中国环保在线 http://www.hbzhan.com/Company_news/Detail/183632.html
你觉得这个胺可以吗？
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8楼2015-12-31 09:41:19
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stonegold

至尊木虫 (知名作家)

铁杆木虫
引用回帖:
4楼: Originally posted by liuanan at 2015-12-31 00:37:37
Cyanine5 NHS ester不能与羧基反应，另找氨基的染料分子

Cy3胺 Cyanine3 amine
Cyanine3 is an fluorophore with free amino group (amino-dye). It can be conjugated with NHS esters, carboxy groups (after activation), and epoxides.

文章链接：中国环保在线 http://www.hbzhan.com/Company_news/Detail/183632.html
这个染料可以吗？
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9楼2015-12-31 09:41:45
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stonegold

至尊木虫 (知名作家)

铁杆木虫
引用回帖:
7楼: Originally posted by liuanan at 2015-12-31 09:10:36
你的DNA是绿光标记的，那你就用蓝光或红光标记纳米材料，比如http://www.fanbobiochemicals.com.cn/product/show-294.html
你的DNA肯定不是GFP标记的，GFP是蛋白，体积太大

DNA上标记的东东应该是转染之后可以表达绿色荧光蛋白的那种。再弱弱的问一句，苯环上的氨基，使用EDC和NHS来和羧基交联可以吗？
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10楼2015-12-31 10:32:44
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