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求教配方是否有问题
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这是跑完之后的条带，目标蛋白大概3000左右…求解释…  发自小木虫IOS客户端 |
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3C丙烯酰胺储存液：24g丙烯酰胺+0.75g甲叉双丙烯酰胺加水定容至50ml过滤 4℃保存 6C 凝胶储存液：23.25g丙烯酰胺+1.5g甲叉双丙烯酰胺加水定容到50ml过滤4℃保存。 30%凝胶缓冲溶液:取30g丙烯酰胺，0.8g甲叉双丙烯酰胺，先用约50mLdH2O溶解，如溶解不完全，可加热至30~50℃溶解，在定容至100mL,然后过滤，置于棕色瓶，4℃下保存备用。 凝胶缓冲溶液：36.342g Tris +0.3g SDS加水定容到100ml，HCl调pH至8.45 过滤4℃保存。 3X凝胶缓冲液液：18.15g Tris，0.15gSDS，溶于40ml水中，用1mol/L的HCL滴定至PH8.45再加水至50ml。 阳极电泳缓冲溶液：0.2M Tris (pH 8.9）（12.114g Tris） 加水定容到500ml 4℃保存。 阴极电泳缓冲溶液: 0.1M Tris+0.1M Tricine +0.1%SDS 不用调pH 6.057 Tris+8.96gTricine +0.5gSDS 加水定容到500ml 4℃保存。 10%(m/V)过硫酸铵（AP) 溶液：取2g过硫酸铵于dH2O溶解后，定容至20mL，现配现用。 1mol/LHCl 500mL:取浓HCl(36%~38%)42mL,慢慢加入蒸馏水中，边加边搅拌，加dH2O定容至500mL,在通风橱中操作。 10%(m/V)SDS溶液：取5gSDS加dH2O定容至50mL(加热溶解） 10%(m/V)TEMED(四甲基乙二胺）：用dH2O配20mL（师姐有） 染色液：取1g考马斯亮蓝R-250，加入450mL甲醇和100mL冰乙酸，用去离子水定容至1000mL。 脱色液：29.2gNaCl，加去离子水定容到1000mL。 样品溶解液：取SDS 2g，β-巯基乙醇5mL，甘油10mL，溴酚蓝0.1g、0.5mol/LTris-HCl (pH 6.8)缓冲液10mL，加去离子水25mL，使总体积为50mL，装于棕色瓶。 发自小木虫IOS客户端 |
2楼2015-12-28 22:44:36
3楼2015-12-29 10:47:59