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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 分子生物 识别真核蛋白
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灰灰三打一

新虫 (初入文坛)

[求助] 分子生物 识别真核蛋白 已有1人参与

急急，我构建的真核载体测序没有问题，p3xflag,倒入293T细胞，表达蛋白。收取细胞没有裂解，pbs洗两次之后，12孔板长满的细胞用60ulpbs悬起来，取10微升煮样，western，用santacruz   -flag标签识别后发现条带，很多，如考染一般。  这里请大神们分析下 怎么回事。

分子生物 识别真核蛋白
pro.jpg
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1楼 2015-12-28 15:40:36
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科学小覃

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
膜封闭没做好吧，要不怎么可能那么多条带。
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生物科学
2楼2015-12-28 19:39:10
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灰灰三打一

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 科学小覃 at 2015-12-28 19:39:10
膜封闭没做好吧，要不怎么可能那么多条带。

嗯  我们之前做别的wb  没什么不同啊  没有问题的  一般封闭6h室温
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3楼2015-12-30 17:01:39
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