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病毒plaque assay 不出现空斑！求助！ 已有2人参与
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我用的病毒是AcNPV，具体实验步骤如下： 1. 把sf9细胞铺满整个六孔盘底部，吸走培养基，加入1ml病毒，浓度分别是10-3、10-4、10-5、10-6、10-7，另外一个孔不加病毒作为对照，放入27度培养箱接种1h. 2.吸走病毒悬液后，盖上一层终浓度为1%的agar胶2ml (2X media+低熔点琼脂糖+10%FBS，低熔点琼脂糖和2X medium各一半)，温度保持在45度左右，保证细胞不被烫死。 3.待agar凝固后，在加入1ml新鲜细胞培养基（无FBS），保证细胞的存活 4.28度细胞培养箱5天之后观察 可以在接种高浓度病毒悬液中看到多角体，但是没有形成空斑，到底是哪个步骤出错了，请大神指教！~~~谢谢！ |
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