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总有二狗咬朕

银虫 (小有名气)

[求助] 体外酶活检测 已有2人参与

求体外酶活检测的方法,如果可以能写出流程不
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我好累,承受这个年纪不该有的帅!
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肖大爷1314

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
还原法
酶与底物在特定的条件下反应,酶可以促使底物释放出还原性的基团.在此反应体系中添加化学试剂 ,酶促反应的产物可与该化学试剂发生反应,生成有色物质.通过在特定的波长下 比色 ,即可求 出还原产物的含量 ,从而计算出酶活力的大小 .
色原底物法
通过底物与特定的可溶性生色基团物质结合,合成人工底物.该底物与酶发生反应后 ,生色基团可被释放出来 ,用分光光度法即可测定颜色的深浅,在与已知标准酶所做的曲线比较后 ,即可求出待测酶的活力.
粘度法
该法常用于测定纤维素酶、木聚糖酶和β-葡聚糖酶 的活力.木聚糖和β-葡聚糖溶液通常情况下可形成极高的粘度,当酶作用于粘性底物时木聚糖和β-葡聚糖会被切割成较小的分子使其粘度大 为降低.基 于Poiseuille定律我们知道 ,只要测定一定条件下溶剂和样品溶液的运动粘度,便可计算特性粘数,并以此来判断酶的活力.
高压液相色谱法
酶与其底物在特定的条件下充分反应后 ,在一定的色谱条件下从反应体系中提取溶液进行色谱分析,认真记录保留时间和色谱图,测量各个样的峰高和半峰高,计算出酶促反应生成物的含量 ,从而换算出酶活力的数值.
免疫学方法
常用 于酶活性分析的免疫学方法包括:免疫电泳法 、免疫凝胶扩散法.这两种方法都是根据酶与其抗体之间可发生特定的沉淀反应 ,通过待测酶和标准酶的比较,最终确定酶活力.免疫学方法检侧度非常灵敏,可检侧出经过极度稀释后样品中的酶蛋白,但其缺点是不同厂家生产的酶产品需要有不同特定的抗体发生反应.
琼脂凝胶扩散法
将酶作用的底物与琼脂混合熔融后 ,倒入培养皿中或载波片上制成琼脂平板.用打孔器在琼脂平面上打出一个约4-5mm半径 的小孔.在点加酶样并培养24h以后 ,用染色剂显色或用展开剂展开显出水解区,利用水解直径和酶活力关系测定酶活力.
这个是类似问题,LZ可以参考一下http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=9719558
                                             http://www.biomart.cn/experiment/430/478/485/56895.htm

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

追求真理的道路上永远不会孤独
4楼2015-12-29 13:16:35
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乘风浮云

新虫 (正式写手)

你要什么酶的测定方法啊,你这问题问的让别人怎么回家啊
2楼2015-12-28 16:47:47
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yyy0305

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
去买个试剂盒,按照步骤走,你就知道了
3楼2015-12-28 21:57:31
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总有二狗咬朕

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 乘风浮云 at 2015-12-28 16:47:47
你要什么酶的测定方法啊,你这问题问的让别人怎么回家啊

师傅让我先了解,然后才有做检测
我好累,承受这个年纪不该有的帅!
5楼2015-12-30 13:14:20
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