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至尊木虫 (著名写手)

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[求助] 兰索拉唑含量测定问题已有1人参与

兰索拉唑含量测定中国药典2015版描述如下：以甲醇-水-三乙胺-磷酸(600 : 400 : 5 : 1.5)[用磷酸溶液（1→10)调节p H 值至7. 3]为流动相，检测波长为284nm。取兰索拉唑约10mg与间氯过氧苯甲酸约10mg,置同一 20ml量瓶中，加甲醇-水（60 : 40)溶液溶解并稀释至刻度，放置10分钟，取10μl注人液相色谱仪，调节流动相比例，使兰索拉唑峰的保留时间约为16分钟……

不是很理解为什么还要调节流动相比例，难道说是甲醇单独放一个管道吗？另一管道是水+三乙胺+磷酸调pH7.3？然后再稍微调节流动性比例？

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命，是失败者的借口；运，是成功者的谦辞。

1楼 2015-12-28 11:18:05

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【答案】应助回帖

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感谢参与，应助指数 +1
865595252: 金币+7, ★★★很有帮助 2015-12-29 08:37:32

1、不同的体系、色谱柱、环境等兰索的出峰时间不一样，与相关杂质的分离度也不一样，其考虑出峰时间在约16分中，预测是在建立方法时此时的分离度良好；
2、药典的方法需提前做确认的，若保留时间和分离度达不到要求，需微调流动相的比例（药典20105版里有允许调整的范围）；
3、至于如何调整流动相中有机相和水相的比例，要看你的预实验情况，但流动相应该是混合后走一个通道，若如你上述所说压力必定很高，甚至可能造成管路堵塞的。