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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 如何用分子生物技术，把增强子复制4个拷贝后放在一个启动子附件？
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zans2009

铜虫 (初入文坛)

[求助] 如何用分子生物技术，把增强子复制4个拷贝后放在一个启动子附件？ 已有1人参与

如题，从植物里面找到一个增强子，我想把这个增强子做成4个拷贝后放在CaMV 35S的启动子附近。主要问题是我不知道如何将这个增强子由一个变为多个，是在引物的5‘端放酶切位点并PCR么？这样的话就多了至少三个酶切位点了吧？特向各位高手求助
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1楼 2015-12-27 10:32:29
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科学小覃

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这么多片段 直接化学合成得了，省事。
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生物科学
2楼2015-12-27 12:55:59
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zans2009

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 科学小覃 at 2015-12-27 12:55:59
这么多片段 直接化学合成得了，省事。

额，也有想过化学合成，但我还是希望用实验手段完成。对了，融合pcr方法似乎也不太好做吧
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3楼2015-12-27 18:34:48
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科学小覃

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zans2009 at 2015-12-27 18:34:48
额，也有想过化学合成，但我还是希望用实验手段完成。对了，融合pcr方法似乎也不太好做吧...

融合PCR还有无痕克隆都是应用于不同的片段之间的，而相同片段之间本身就是互补的，理论上行不通吧。
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生物科学
4楼2015-12-28 08:11:36
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zans2009

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 科学小覃 at 2015-12-28 08:11:36
融合PCR还有无痕克隆都是应用于不同的片段之间的，而相同片段之间本身就是互补的，理论上行不通吧。...

确实，看来只能多加几个酶切位点了
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5楼2015-12-28 21:25:22
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Neo2000

木虫 (著名写手)
用两组同尾酶就搞定了，简单

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zans2009
6楼2015-12-28 22:57:40
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zans2009

铜虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by Neo2000 at 2015-12-28 22:57:40
用两组同尾酶就搞定了，简单

嗯，感谢您的回复

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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7楼2015-12-29 08:34:47
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