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mulezy

新虫 (初入文坛)

[交流] DNA提取量很少,除了pcr还有别的方法扩增吗? 已有5人参与

想从血中提取某种成分分泌的DNA,我用试剂盒提取之后,浓度只有2.5ng/ul,不知道pcr能否扩增后跑出来?各位大神,有没有更加好的微量扩增方法?
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科学小覃

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
总量量多的话可以进行乙醇沉淀,70%乙醇,-20度过夜,高速离心,去上清,晾干后加水或TE重新溶解.
生物科学
2楼2015-12-26 20:59:03
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lgd2012

银虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
这个浓度我用东洋纺的kod酶套装p过,先25ul体系32cycle,再取pcr产物3至5ul作为模板二次pcr,如果你的引物可以保证特异性,是可以p出来好效果的

发自小木虫Android客户端
3楼2015-12-27 02:57:59
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吗子

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以的,PCR模板10-30ug足矣
深秋
4楼2015-12-27 14:17:19
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heianduck

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你抽提最后加了多少的ddH2O?  不过一般能看到条带就能扩增出东西来
5楼2015-12-28 08:22:34
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joeming123

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
浓度2.5ng/ul,  pcr应该没问题的。   如果不行,可以看看 重组酶聚合酶扩增。 我没做过呢,不知效果如何。
现在的路越来越难走
6楼2015-12-28 09:57:12
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