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夏末秋初2060银虫 (初入文坛)
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Waters XBridge C18反向柱被堵了，很多方法试柱压下不去，求帮忙 已有3人参与
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情况描述： 一、我们课题组有一根Waters XBridge 色谱柱之前一直用来分离多肽或者修饰有糖环的化合物，化合物水溶性挺好的，由于被其他人分离一些有机小分子的化合物，柱子被堵了，现在已经做得处理方法是1、0.2mL/min CH3OH,柱子反过来冲，没有效果 2、后来改用四氢呋喃正向冲柱子，可是柱压一直下不去，只是冲出来很多絮状物，3、后来一个不太懂的学生在用5%CH3CN，95% H2O冲，犯傻，发现柱压没有下去，又直接换回了THF，依然没有作用；4、再接着没有办法了，直接用色谱用的DMF冲4h，然后换成纯甲醇冲依然下不去，压力很大，无法使用？请问这种情况是不是柱子报废了？ 二、请问我们还有一根新的一样part NO. 的柱子，只是Seris NO.不一样，请问这根新柱子开始使用时，应该怎处理，有说明书，但是只是说对应的东西的出峰，求帮助！ |
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【答案】应助回帖
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夏末秋初2060: 金币+50, ★★★很有帮助 2015-12-28 11:24:51
夏末秋初2060: 金币+50, ★★★很有帮助 2015-12-28 11:24:51
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一、回答 看看原来柱子的说明书，看看pH、温度的限值，还有能不能走纯水。可以参考下边这个序列，冲几次看看： 0-30min，0.1%TFA的水溶液，保持30min 30-60min，过渡至0.1%TFA的ACN溶液 60-100min，保持不变 100-130min，过渡至初始流动相 流速 0.8 mL/min （如果是UPLC柱子流速0.3） 柱温 60摄氏度 二、回答 1. 柱子首端连入仪器，末端排废，不连检测器。纯有机相，常用分析流速20柱体积冲洗。 2. 柱子连入仪器，纯有机相低俗隔夜冲洗。 3. 选择一种等度的简单流动相组成的单一组分的分析方法，20倍柱体积平衡柱子后，连进7针。记录：柱压、保留时间、该组分理论塔板数。 4. 定期进行第3步操作，注意那三个参数的变化，定期冲洗维护柱子。 5. 平时色谱柱使用结束后，尽量根据测试条件，有针对性的选择合适的流动相彻底冲洗，20倍柱体积以上。 发自小木虫IOS客户端 |
14楼2015-12-28 00:22:22
鸭绿江畔
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2楼2015-12-26 14:30:34
夏末秋初2060
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4楼2015-12-26 14:46:05
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