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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 细胞在冻存过程中（-80℃）冻存液变黄是什么原因？
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jlee2012

木虫 (小有名气)

[求助] 细胞在冻存过程中（-80℃）冻存液变黄是什么原因？ 已有6人参与

如题，而且复苏效果极差（贴壁细胞）！（冻存液配方FBS：DMEM：DMSO=50:30:20）
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1楼 2015-12-25 12:30:14
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zhenwuhuang

至尊木虫 (文学泰斗)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
jlee2012: 金币+1, ★有帮助 2015-12-28 13:09:38
将DMSO和FBS加入DMEM中，各自含量占总体积的10%，然后滤膜过滤后分装保存备用。
DMSO一般要用新鲜的，分装保存，如果多次开评后，可能受氧化而变质，如果你的DMSO颜色为黄色，表示已经变质，不可用。
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10楼2015-12-26 15:32:54
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肖大爷1314

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
jlee2012: 金币+5, ★有帮助 2015-12-25 15:07:18
跟你的冻存液的配方有关，FBS加多了当然是黄的，DMEM加的多就是红的，不过既然复苏效果不好，要不要考虑试试FBSMSO 9:1 ？虽然现在血清很贵很贵~~~~我复苏的时候一般是MDED:FBSMSO 7：2：1，也有6:6:2的~个人经验是复苏时最后将细胞复苏在正常细胞培养血清浓度两倍的培养基（而且至少要高于10%），不然细胞很容易死
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追求真理的道路上永远不会孤独
2楼2015-12-25 14:53:06
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jlee2012

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 肖大爷1314 at 2015-12-25 14:53:06
跟你的冻存液的配方有关，FBS加多了当然是黄的，DMEM加的多就是红的，不过既然复苏效果不好，要不要考虑试试FBSMSO 9:1 ？虽然现在血清很贵很贵~~~~我复苏的时候一般是MDED:FBSMSO 7：2：1，也有6:6:2的~个人经 ...

冻存液刚配好时是红色的~过了三个月来看发现都是黄色的了！会不会细胞消耗了？
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3楼2015-12-25 15:08:28
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肖大爷1314

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by jlee2012 at 2015-12-25 15:08:28
冻存液刚配好时是红色的~过了三个月来看发现都是黄色的了！会不会细胞消耗了？...

毕竟细胞冻存也不是完全停止代谢活动的，祝顺利啊，你改改配方估计就没这问题了~
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追求真理的道路上永远不会孤独
4楼2015-12-25 15:27:55
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