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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 测序结果有重叠峰
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taocuihua

铜虫 (小有名气)

[交流] 测序结果有重叠峰

请教各位：普通的PCR，产物用纯化试剂盒纯化以后送去测序，测序公司回信说无信号，打电话过去问又说是重叠峰很严重，是什么意思啊？都有哪些因素可能造成这样的问题呢？懂的大虾进来帮帮忙吧！提前谢过啦！
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1楼 2008-09-25 10:29:27
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jasco

木虫 (正式写手)
pcr产物不纯导致的，
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2楼2008-09-25 10:38:24
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yuyixst

木虫 (正式写手)
好像是DNA不纯
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3楼2008-09-25 10:43:06
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yangym1123

木虫 (小有名气)
应该是PCR产物不纯吧！
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4楼2008-09-25 13:08:57
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taocuihua

铜虫 (小有名气)
谢谢各位！
可是我的电泳检测结果显示条带单一，而且很窄，特异性也很好，并且拿纯化试剂盒纯化过啊~怎么还会不纯呢？那要注意些什么才可以啊？
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5楼2008-09-25 15:02:31
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snzydong

铁杆木虫 (著名写手)
按你这么说 那肯定是没有问题了 问题可能在测序公司 那些话只是托词
建议你：一 换个公司测
           二 把片段连到载体上测序 如pmd18-T
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6楼2008-09-25 16:16:30
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hhaidong

木虫 (正式写手)
建议：pcr产物直接送去，让他们纯化
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7楼2008-09-25 16:49:31
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xipha

木虫 (正式写手)
克隆下然后挑单菌落
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8楼2008-09-25 17:10:39
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taocuihua

铜虫 (小有名气)
多谢各位啊！感激不尽！
听了大家的建议以后我打算先送样品让测序公司纯化试试，或者换换测序公司，不行的话再考虑克隆，因为我的师姐说我的实验没有必要克隆呢。
多谢啦哈！
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9楼2008-09-25 17:51:03
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月月大可

木虫 (著名写手)
通过划线分离,挑取单菌落送公司测序
还不行就换家测序公司
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10楼2008-09-25 18:30:31
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