应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » A7r5冻存后复苏，大面积死亡
51/1返回列表
查看: 1748  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

tylll

铜虫 (初入文坛)

[求助] A7r5冻存后复苏，大面积死亡

最近在养A7r5，收到细胞后用DMEM+10%GIBCO血清培养及冻存（1x10^6每管，1:9=DMSO：FBS），倍增时间约48h，复苏后细胞大片死亡，一管细胞在6cm皿中要长两周左右才能长满，检测没有支原体污染，请问这是为什么呢？  看别人用相同条件养的挺好的，是需要加入明胶等基质或NEAA、谷氨酰胺、β-ME之类的试剂吗？
   我昨天复苏了2x10^6到6cm皿，今天观察很多细胞贴在皿底没有伸展开，估计明天又会死一大片，

   请教一下内皮细胞的培养条件中需要加些什么试剂？你们的培养条件是怎么样的？着急哟。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
上弦月
1楼 2015-12-22 19:10:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

半夏姑娘

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
7楼2017-07-23 00:43:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

北国佳人

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
tylll(wizardfan代发): 金币+20, 感谢应助 2015-12-24 06:29:06
慢冻快复，，复苏时操作快些，
赞一下(1人) 回复此楼
努力的小蜜蜂
2楼2015-12-22 20:09:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tylll

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 北国佳人 at 2015-12-22 20:09:26
慢冻快复，，复苏时操作快些，

谢谢，我在冻存时用梯度降温盒放置-80℃过夜，复苏从取出到放入培养箱控制在5min。我前天复苏了一支细胞，今天观察发现细胞贴壁但不伸展。另外我尝试换血清（密理博）和添加谷氨酰胺、非必需氨基酸和丙酮酸钠，前者细胞较亮，死细胞多，后者死细胞少而状态不佳。请问该细胞需要长时间（48h）静止培养吗，谢谢。
赞一下 回复此楼
上弦月
3楼2015-12-23 10:13:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jindianama

新虫 (初入文坛)
楼主需不需要效果更好的贴壁培养皿
赞一下 回复此楼
4楼2015-12-28 13:37:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +4 西山十月 2026-08-09 6/300 2026-08-10 00:16 by liufeng0619
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +4 布布和一二 2026-08-08 4/200 2026-08-09 22:24 by otj2008
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +15 且听虎啸 2026-08-07 22/1100 2026-08-09 22:13 by 布布和一二
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] fileCode有新解读？ +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制，评价高的钱多评价低的钱少，但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 基金中了 +14 laoda193707 2026-08-06 14/700 2026-08-08 00:23 by 实验小白ha
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 娱乐 +6 Tide man 2026-08-03 6/300 2026-08-07 22:40 by 铁帽子农民
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？ +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 8月时间戳变的，举个手。玩一下，释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
[基金申请] 有没有H口的？有收到消息的吗？ +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[基金申请] 纯娱乐，不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭