应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » A7r5冻存后复苏，大面积死亡
51/1返回列表
查看: 1560  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

tylll

铜虫 (初入文坛)

[求助] A7r5冻存后复苏，大面积死亡

最近在养A7r5，收到细胞后用DMEM+10%GIBCO血清培养及冻存（1x10^6每管，1:9=DMSO：FBS），倍增时间约48h，复苏后细胞大片死亡，一管细胞在6cm皿中要长两周左右才能长满，检测没有支原体污染，请问这是为什么呢？  看别人用相同条件养的挺好的，是需要加入明胶等基质或NEAA、谷氨酰胺、β-ME之类的试剂吗？
   我昨天复苏了2x10^6到6cm皿，今天观察很多细胞贴在皿底没有伸展开，估计明天又会死一大片，

   请教一下内皮细胞的培养条件中需要加些什么试剂？你们的培养条件是怎么样的？着急哟。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
上弦月
1楼 2015-12-22 19:10:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tylll

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by jindianama at 2015-12-28 13:37:23
楼主需不需要效果更好的贴壁培养皿

谢谢，正在买cell bind。
赞一下 回复此楼
上弦月
5楼2016-01-07 18:42:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

北国佳人

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
tylll(wizardfan代发): 金币+20, 感谢应助 2015-12-24 06:29:06
慢冻快复，，复苏时操作快些，
赞一下(1人) 回复此楼
努力的小蜜蜂
2楼2015-12-22 20:09:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tylll

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 北国佳人 at 2015-12-22 20:09:26
慢冻快复，，复苏时操作快些，

谢谢，我在冻存时用梯度降温盒放置-80℃过夜，复苏从取出到放入培养箱控制在5min。我前天复苏了一支细胞，今天观察发现细胞贴壁但不伸展。另外我尝试换血清（密理博）和添加谷氨酰胺、非必需氨基酸和丙酮酸钠，前者细胞较亮，死细胞多，后者死细胞少而状态不佳。请问该细胞需要长时间（48h）静止培养吗，谢谢。
赞一下 回复此楼
上弦月
3楼2015-12-23 10:13:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jindianama

新虫 (初入文坛)
楼主需不需要效果更好的贴壁培养皿
赞一下 回复此楼
4楼2015-12-28 13:37:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 欢迎采矿、地质、岩土、计算机、人工智能等专业的同学报考 +3 pin8023 2026-02-28 5/250 2026-03-02 00:24 by 花YOU重开日
[基金申请] 本子写完了，给DS兄弟看了，得了92分 +3 Doma 2026-03-01 7/350 2026-03-02 00:00 by jnzsy
[考研] 材料学硕318求调剂 +11 February_Feb 2026-03-01 13/650 2026-03-01 23:53 by ccp273206157
[考研] 265分求调剂不调专业和学校有行学上就 +6 礼堂丁真258 2026-02-28 8/400 2026-03-01 22:50 by jian_
[考研] 0856调剂 +5 刘梦微 2026-02-28 5/250 2026-03-01 22:30 by wang_dand
[考研] 272求调剂 +6 田智友 2026-02-28 6/300 2026-03-01 21:40 by 公瑾逍遥
[考研] 299求调剂 +3 Y墨明棋妙Y 2026-02-28 5/250 2026-03-01 21:01 by tangxiaotian
[考研] 306分材料调剂 +4 chuanzhu川烛 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:48 by 无际的草原
[考研] 0856化工专硕求调剂 +12 董boxing 2026-03-01 12/600 2026-03-01 19:45 by 材子momo
[考研] 298求调剂 +6 axyz3 2026-02-28 6/300 2026-03-01 19:00 by 18137688336
[考研] 一志愿中南大学理学化学 +4 15779376950 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:00 by Fff-1
[考研] 295求调剂 +7 19171856320 2026-02-28 7/350 2026-03-01 18:54 by 18137688336
[考研] 328求调剂 +3 aaadim 2026-03-01 5/250 2026-03-01 17:29 by njzyff
[考研] 290求调剂 +9 材料专硕调剂； 2026-02-28 11/550 2026-03-01 17:21 by sunny81
[考研] 311求调剂 +6 亭亭亭01 2026-03-01 6/300 2026-03-01 15:41 by 324616
[考研] 材料工程274求调剂 +3 Lilithan 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:58 by ms629
[考研] 求调剂 +6 repeatt?t 2026-02-28 6/300 2026-03-01 14:37 by Sakura绘
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧？ +5 ieewxg 2026-02-25 6/300 2026-03-01 00:10 by addressing
[考研] 304求调剂 +3 52hz~~ 2026-02-28 5/250 2026-03-01 00:00 by 52hz~~
[考研] 264求调剂 +3 巴拉巴拉根556 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:31 by gaoxiaoniuma
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭