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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PAGE胶跑DNA
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liuxinyueer

木虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by ssswzf at 2015-12-18 23:29:40
做个尿素变性电泳跑DNA，以前做的是AFLP，染色用银染，显色液也是配套的！

一定要变性吗
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11楼2015-12-19 20:20:55
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wj2105

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
跑完之后，有银染法和EB法两种，个人感觉银染法的条带更多，更细
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女博一枚
12楼2015-12-21 09:32:48
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liuxinyueer

木虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by ssswzf at 2015-12-18 23:29:40
做个尿素变性电泳跑DNA，以前做的是AFLP，染色用银染，显色液也是配套的！

PAGE胶，我用的是western blot模具做的，量按照书上相对缩小了。但是不像跑蛋白有个浓缩胶，可以把样品压缩成一条线，它竖着跑起来是弥散的。染色一定要银染吗，不能像跑琼脂糖一样EB染色吗？
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13楼2015-12-21 13:42:34
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sail000000

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

不一样，比WB的板子要大，你可以百度一下，SSR等分子标记用的胶
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14楼2015-12-21 14:56:30
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xujian568

至尊木虫 (著名写手)

Count XU

【答案】应助回帖

PAGE胶是和平时做western blot的胶配方有差异，
DNA Polyacrylamide Gel Electrophoresis
http://microbiology.ucdavis.edu/ ... 013/11/DNA_PAGE.pdf
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活着就要让人感受到你的存在。
15楼2015-12-22 19:51:41
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xujian568

至尊木虫 (著名写手)

Count XU

【答案】应助回帖

补充下，板子没有关系，一般的蛋白板就可以，缓冲液用TBE
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活着就要让人感受到你的存在。
16楼2015-12-22 19:52:55
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xujian568

至尊木虫 (著名写手)

Count XU

【答案】应助回帖

再补充下，染色eb就可以，没有什么特殊要求
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活着就要让人感受到你的存在。
17楼2015-12-22 19:53:47
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liuxinyueer

木虫 (正式写手)
引用回帖:
17楼: Originally posted by xujian568 at 2015-12-22 19:53:47
再补充下，染色eb就可以，没有什么特殊要求

谢谢
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18楼2015-12-22 21:12:20
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老妖27

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

工具和wb一样，配胶的时候不用sds直接一整块就可以，胶浓度越高，分离的越小，像你这么小的片段，大概需要8%到10%的胶了，当然跑的时间越长，跑的时候加冰降温，跑完用EB泡一会就可以直接拍了，我曾经用那东西跑了一个暑假

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19楼2015-12-23 08:19:30
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