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ljyd

新虫 (初入文坛)

[求助] 大鼠原代肝细胞分离,活率一直上不去,求助大神! 已有1人参与

从六月就开始学做大鼠原代肝细胞的分离,断断续续做了快三个月了,活率仍然很不稳定。采用的是 Selgen 两步胶原酶灌注法,过300目的细胞筛后用台盼蓝拒染法来检测细胞活率。除了已经发现的,胶原酶灌注时间、温度、手术操作时间等因素外,最近经常发现类似下图这样大团的聚集在一起的死细胞。实验室师姐认为是离心后没有吹散,可是活细胞并不会像死细胞那样聚集。能不能请做过这类实验的大神指点一二,万分感谢!
大鼠原代肝细胞分离,活率一直上不去,求助大神!
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ljyd

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by becklittle at 2015-12-18 12:59:09
不知道咋会聚集,不过lz染的这个很漂亮呀,我用taipanlan染出来没那么高的辨识度,lz是怎么染的?

貌似是我求助啊!大哥!你试着用沸水煮胎盘蓝原液,然后再放水浴锅。顺便问一下,您灌流出来,细胞活率一般能有多少?

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7楼2015-12-19 10:46:39
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匿名

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感谢参与,应助指数 +1
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2楼2015-12-18 01:23:10
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ljyd

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by becklittle at 2015-12-18 01:23:10
可是最影响存活率的就是胶原酶灌注时间、温度、手术操作时间等因素

多谢回复!这个我们试过很多次,有取得比较好效果的。现在比较麻烦的就是这个大团,大团的死细胞,如果能找出原因解决的话。只剩游离的活细胞占比就很高了。

发自小木虫IOS客户端
3楼2015-12-18 08:40:00
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匿名

用户注销 (正式写手)

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4楼2015-12-18 09:13:19
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