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[求助]
离子交换层析法从酪蛋白中分离纯化αs1-酪蛋白已有1人参与
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我现在想用离子交换层析法从酪蛋白中分离纯化αs1-酪蛋白，有没有人可以帮我设计一个实验方案，非常感谢！ |
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3楼2015-12-16 17:02:24
hc-material
专家顾问 (职业作家)
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【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yuxiaofeng(99503102代发): 金币+2, 回帖很精彩，继续加油！ 2015-12-17 14:44:47
yuxiaofeng(99503102代发): 金币+3, 继续加油！ 2016-03-08 09:53:29
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yuxiaofeng(99503102代发): 金币+3, 继续加油！ 2016-03-08 09:53:29
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阴阳离子交换的都试： 1.将你的样品用PH7.0的20mMPBS加氯化钠50mM溶解你的样品，若液体的可以直接置换成这个体系（抽滤，在用这个溶解） 2.层析介质Q高流速琼脂糖微球和SP高流速琼脂糖微球。买回来装柱，然后用溶解样品的缓冲液平衡柱子。 3.上样 4.洗脱，用溶解样品的缓冲液加50,100,150,200，250,300,350,400,450,500mM氯化钠分别洗脱，收集洗脱峰，每个洗5个柱体积，然后分别检测，看你要的蛋白在那个梯度氯化钠浓度里面，若有条件AKTA蛋白纯化仪，可连续梯度。 5.确定了用阴离子还是阳离子后。可以尝试弱阴的DEAE(对应Q）或若阳的（对应CM)，然后在安4的流程走一边，看纯度，然后改变PH啊，盐浓度啊优化。 6.过完了用葡聚糖G25把氯化钠置换掉。就这么简单。祝顺利 |
2楼2015-12-16 15:32:57