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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 其他 » 离子交换层析法从酪蛋白中分离纯化αs1-酪蛋白
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yuxiaofeng

铁虫 (初入文坛)

[求助] 离子交换层析法从酪蛋白中分离纯化αs1-酪蛋白 已有1人参与

我现在想用离子交换层析法从酪蛋白中分离纯化αs1-酪蛋白，有没有人可以帮我设计一个实验方案，非常感谢！
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努力努力
1楼 2015-12-16 15:20:40
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yuxiaofeng(99503102代发): 金币+2, 回帖很精彩，继续加油！ 2015-12-17 14:44:47
yuxiaofeng(99503102代发): 金币+3, 继续加油！ 2016-03-08 09:53:29
阴阳离子交换的都试：
1.将你的样品用PH7.0的20mMPBS加氯化钠50mM溶解你的样品，若液体的可以直接置换成这个体系（抽滤，在用这个溶解）
2.层析介质Q高流速琼脂糖微球和SP高流速琼脂糖微球。买回来装柱，然后用溶解样品的缓冲液平衡柱子。
3.上样
4.洗脱，用溶解样品的缓冲液加50,100,150,200，250,300,350,400,450,500mM氯化钠分别洗脱，收集洗脱峰，每个洗5个柱体积，然后分别检测，看你要的蛋白在那个梯度氯化钠浓度里面，若有条件AKTA蛋白纯化仪，可连续梯度。
5.确定了用阴离子还是阳离子后。可以尝试弱阴的DEAE(对应Q）或若阳的（对应CM)，然后在安4的流程走一边，看纯度，然后改变PH啊，盐浓度啊优化。
6.过完了用葡聚糖G25把氯化钠置换掉。就这么简单。祝顺利
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2楼2015-12-16 15:32:57
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yuxiaofeng

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hc-material at 2015-12-16 15:32:57
阴阳离子交换的都试：
1.将你的样品用PH7.0的20mMPBS加氯化钠50mM溶解你的样品，若液体的可以直接置换成这个体系（抽滤，在用这个溶解）
2.层析介质Q高流速琼脂糖微球和SP高流速琼脂糖微球。买回来装柱，然后用溶 ...

我看到一篇英文文献中的缓冲液是含有尿素和DTT的甲酸钠溶液，这个缓冲液的选择什么较合适
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努力努力
3楼2015-12-16 17:02:24
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