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问个关于大肠杆菌培养的问题 已有2人参与
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我是养菌菜鸟,先请教下, 1.一般-80度取出的大肠杆菌菌种(top10)复苏需要12-16小时,中间可以中断吗?比如培养2小时取出常温放个5小时再继续培养?中断会造成什么结果。中断是否用比较合适的方法,有时候时间安排不好,第二天来又怕时间太长了。 2.我是做定向突变的,大肠杆菌,然后用氯化钙处理后,制备感受态细胞,在加入需要导入的质粒,请问最后一部用氯化钙处理以后在4度放几个小时比较合适,转化效率最高?另外制备好的感受态细胞听说可以直接保存,下次不用再次用氯化钙处理?请问如何保存,下次使用直接复苏就可以了吗?还是有严格的操作流程? |
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