24小时热门版块排行榜    

查看: 1782  |  回复: 4

banana499

新虫 (初入文坛)

[求助] 问个关于大肠杆菌培养的问题 已有2人参与

我是养菌菜鸟,先请教下,
1.一般-80度取出的大肠杆菌菌种(top10)复苏需要12-16小时,中间可以中断吗?比如培养2小时取出常温放个5小时再继续培养?中断会造成什么结果。中断是否用比较合适的方法,有时候时间安排不好,第二天来又怕时间太长了。

2.我是做定向突变的,大肠杆菌,然后用氯化钙处理后,制备感受态细胞,在加入需要导入的质粒,请问最后一部用氯化钙处理以后在4度放几个小时比较合适,转化效率最高?另外制备好的感受态细胞听说可以直接保存,下次不用再次用氯化钙处理?请问如何保存,下次使用直接复苏就可以了吗?还是有严格的操作流程?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
banana499: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-12-17 14:42:21
1.中断一般没事,为啥要中断了,12到16个小时,那你晚上8点接,第二天8点收不好么。
2.感受态制备及保存的事情请看《分子克隆手册》或者《分子克隆实验指南》上面很详细的。祝顺利
2楼2015-12-17 09:40:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jasany

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
中断本身没什么事,就是怕移来移去,感染杂菌
失败的唯一原因是专注被打破了
3楼2015-12-17 10:56:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

banana499

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hc-material at 2015-12-17 09:40:23
1.中断一般没事,为啥要中断了,12到16个小时,那你晚上8点接,第二天8点收不好么。
2.感受态制备及保存的事情请看《分子克隆手册》或者《分子克隆实验指南》上面很详细的。祝顺利

主要是,放进去的时候忘记计算时间了。。。。摇了一小时才发现太早了,于是拿到室放了几个小时离开实验室在放进摇床
4楼2015-12-17 14:43:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

二在奔三路上

新虫 (初入文坛)

如果是多级发酵的话,可以不用复苏
5楼2015-12-29 09:41:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 banana499 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +3 a089 2026-08-26 3/150 2026-08-26 23:21 by young90
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 怎么查啊 +5 huang1991js 2026-08-26 5/250 2026-08-26 16:09 by Equinoxhua
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +9 炎黄贵胄 2026-08-22 10/500 2026-08-26 15:40 by semaglutide
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +22 羊腰板 2026-08-21 25/1250 2026-08-26 15:00 by zuocuiping
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合现在查不到了吗? +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 明天应该可查了!? +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[基金申请] 人气不行了 +11 fansofjerry 2026-08-21 11/550 2026-08-25 11:04 by 孤独的英雄6
[基金申请] 我面上完蛋了 +13 且听虎啸 2026-08-20 14/700 2026-08-25 09:10 by mrkang
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 让我中一个面上吧! +13 大萍1987 2026-08-20 16/800 2026-08-24 10:23 by 太傻了
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
信息提示
请填处理意见