24小时热门版块排行榜    

查看: 3630  |  回复: 16
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

bbsoslolita

银虫 (小有名气)

[求助] 还原响应载药胶束体外释放实验总是失败-释放率很低。 已有2人参与

大家好,最近我一直在做还原响应的载药胶束的体外缓释实验,但是结果都很不好,在还原性条件下的和不在还原性条件下的、具有还原响应性和不具还原响应性的胶束的释放率都差不多,而且DTT做的释放率很低,48h还不到10%。
我的实验方法:
4mL 1mg/mL的载药胶束溶液装入透析袋,透析袋外面加46mL PBS7.4透析液,DTT作为还原剂,浓度为0,或者是10mM。
实验在37摄氏度下进行,透析袋方面放置了搅拌子搅拌,每隔一段时间取样,补充透析液。样品测试UV,绘制成缓释曲线。
我不知道是不是由以下原因引起的:
1. 胶束溶液浓度太高,导致DOX释放不出来,或者是扩散地很慢。我看文献上有跟我差不多的,1mg/mL,也有很低的,0.025mg/mL。我是用UV测DOX释放量的,在1mg/mL的浓度下UV的测试已经捉襟见肘了,如果要在极低浓度下进行,恐怕要用荧光光谱仪来测试。
2. 没有使用摇床,因为没有条件,所以改成了透析袋外搅拌子搅拌,我的胶束是由两亲性的聚合物构成的,疏水端由二硫键交联。打开交联后,亲疏水聚合物可能还是组成胶束,没有解离,再加上没有摇床震荡,所以药物出来很慢。
3. 还原剂的问题。最初使用的是GSH来还原,但是发现透析液中会出现白色絮状的沉淀,可能是GSH在37摄氏度下会变质,这沉淀影响了紫外吸收,抬高了基线,使得释放率超出了理论值。后来我改成了DTT,发现DTT做出来的释放率很低,48h不到10%,还没有GSH做出来的高(48h 30%左右,但没有排除沉淀吸收的影响),就算是没有加DTT的都有4%,难道是DTT变质了?
问题比较麻烦,请了解的虫友和前辈多多指点,感激不尽。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

geyanxiu

金虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by bbsoslolita at 2016-01-12 15:39:20
一方面是跟实验室条件结合,体积相加50mL刚好可以没过放在50mL烧杯中的透析袋并让透析夹固定不动。
一方面是参考文献中两者的体积,透析袋外面的透析液足够多以满足漏槽效应,还要考虑透析袋内的胶束含量使得以后 ...

楼主只是改变了胶束的浓度就解决问题了么?我做的还原响应性的胶束也是释放不出来,但是已达到漏槽条件啊,48小时2%左右,而且DTT组与不加DTT组差别不大
11楼2016-03-30 09:39:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 17 个回答

lx815744820

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

1.建议用GSH,因为你要和制剂在体内的环境相对应,而且你用GSH的效果不错,那个沉淀没有包含红色的药物就没有问题。
2.DTT的量会不会加少了?
Whereisawill,thereisaway!
4楼2016-01-08 09:13:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bbsoslolita

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by lx815744820 at 2016-01-08 09:13:18
1.建议用GSH,因为你要和制剂在体内的环境相对应,而且你用GSH的效果不错,那个沉淀没有包含红色的药物就没有问题。
2.DTT的量会不会加少了?

啊,谢谢你了,我现在是用GSH在做,然后导致问题的原因现在锁定在双键和GSH发生反应所导致。
5楼2016-01-08 15:57:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qwe0907123

木虫 (正式写手)

你好,你的4ml的胶束溶液和46ml的PBS缓冲液,这两个体积是怎么确定的?
7楼2016-01-11 21:36:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 3/150 2026-08-29 03:03 by gy1nBQXYQJqL
[教师之家] 导师吐槽:我怎么摊上了这么个极品研究生! +8 苏东坡二世 2026-08-23 8/400 2026-08-28 14:41 by lkforward
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +4 gdd2018 2026-08-28 9/450 2026-08-28 14:22 by jklily
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +3 bud_bud 2026-08-27 6/300 2026-08-28 11:53 by bud_bud
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[基金申请] 申请删除本帖 +6 lyz123lyz 2026-08-27 7/350 2026-08-27 17:31 by 宁静致远sy
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候,我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
信息提示
请填处理意见