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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助用上海生工试剂盒提取质粒的虫子
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蛋白小王子6

银虫 (小有名气)

[求助] 求助用上海生工试剂盒提取质粒的虫子 已有1人参与

各位虫子好，
     今天遇到这样一个困难：实验步骤是这样的，昨天晚上用液体LB加入Amp，然后从－80度里面吸了一点菌液，摇了两管8ml菌液。今天看见菌液浑浊开始提质粒，然后用上海生工的小提试剂盒提取质粒，检测质粒浓度在10ng/ul。我想问为什么会这么低，之前很少做基因工程这一块，还是当着师妹的面连个质粒液没提出来。做师兄真够难堪的了。
   所以求助给位虫子，多谢多谢。
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1楼 2015-12-15 20:01:54
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fmm123

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
蛋白小王子6: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 你好 不好意思 刚刚回复。我没有注意到想象，难道是我的菌液太高的缘故么？ 多谢 2016-01-17 14:40:14
试剂盒中加溶液1.2.3都会有相应的现象，你的出现相应现象了吗？
菌液的话，太多菌的话裂解不完全，溶度也会很低的。。
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2楼2015-12-18 09:01:38
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fmm123

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fmm123 at 2015-12-18 09:01:38
试剂盒中加溶液1.2.3都会有相应的现象，你的出现相应现象了吗？
菌液的话，太多菌的话裂解不完全，溶度也会很低的。。

嗯，有可能的，裂解不完全的话浓度会有影响的
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3楼2016-01-18 18:13:27
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原海亮

木虫 (著名写手)
这个和菌的培养的情况有关的，但是最重要，天气冷了，溶液2中的SDS低温会析出来，会使裂解作用降低，甚至很差，所以使用前应先将溶液2加热使完全清亮，再进行菌体裂解，如果菌浓较高，要适当增加123的量，祝好！

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天空才是极限，我有信心飞的更高！
4楼2016-01-18 18:23:40
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蛋白小王子6

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 原海亮 at 2016-01-18 18:23:40
这个和菌的培养的情况有关的，但是最重要，天气冷了，溶液2中的SDS低温会析出来，会使裂解作用降低，甚至很差，所以使用前应先将溶液2加热使完全清亮，再进行菌体裂解，如果菌浓较高，要适当增加123的量，祝好！
...

谢谢原海亮 这个实验现在停了下来忙其他的了 多谢你啊 以后一定还会做的 多谢

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读书也不必只读纸做的书，山水可以读，云雨可以读，官场可以读，商界可以读，赌徒和妓女也是书，只在家读书，读了书还是书，无异于整日喝酒、打牌和吸烟土。
5楼2016-01-18 23:03:28
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heianduck

金虫 (正式写手)
我们都是自己配试剂，用碱裂解

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6楼2016-01-18 23:40:20
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蛋白小王子6

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by heianduck at 2016-01-18 23:40:20
我们都是自己配试剂，用碱裂解

是啊 成熟的实验室都是这样。 多谢关注。

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7楼2016-01-19 01:34:36
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