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zxg200910银虫 (正式写手)
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[交流]
酶动力学(enzyme kinetics)
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各位虫友，刚接触酶学，很多疑问，希望前辈们不吝赐教。 学到酶动力学章节是，明白了米氏方程相关假设和推导，但动力学都是考虑的，其他条件pH,T及酶浓度[E]一定，不同底物浓度[S]时(这里并且要求[S]远大于[E])的初速度，但是还是不知道这个“initial velocity”在实际实验中如何测定和确定。本人理解应该是体系单位时间产物的产生量或底物的消耗量（通常用摩尔浓度表示这个量）。但这个单位时间如何设定？看文献，有的用15min内的平均速率表示，有的用60min。不怎么理解？这个初速率不是应该根据不同[s]体系，产物随时间的变化曲线，根据初始线性那一段时间来计算吗？ 求解，不胜感激！ 另外，望推荐一些经典文章和参考资料，中英都可以。还有就就目前酶动力学研究的最新技术和方法，理论也可以推荐。 |
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yyy0305
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zxg200910: 金币+2, 太好啦，感谢分享和指导 2015-12-15 23:38:03
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| initial velocity指的是时间-产物反应曲线最初的一段时间内线性范围内的斜率，不同的酶和底物作用这个时间是不一样的，楼主需要做动力学曲线，即不同浓度的底物和酶反应，每个30S或者1min进行一次检测，持续30min-60min,然后根据时间-产物的反应曲线，确定在多长的时间内所有底物浓度点的曲线是线性的，该斜率即为initial velocity。附件的文档有详细酶Km测定的过程，实际操作，原理方面的推导都有 |
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