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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 酶动力学(enzyme kinetics)
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zxg200910

银虫 (正式写手)

[交流] 酶动力学(enzyme kinetics)

各位虫友，刚接触酶学，很多疑问，希望前辈们不吝赐教。
    学到酶动力学章节是，明白了米氏方程相关假设和推导，但动力学都是考虑的，其他条件pH,T及酶浓度[E]一定，不同底物浓度[S]时(这里并且要求[S]远大于[E])的初速度，但是还是不知道这个“initial velocity”在实际实验中如何测定和确定。本人理解应该是体系单位时间产物的产生量或底物的消耗量（通常用摩尔浓度表示这个量）。但这个单位时间如何设定？看文献，有的用15min内的平均速率表示，有的用60min。不怎么理解？这个初速率不是应该根据不同[s]体系，产物随时间的变化曲线，根据初始线性那一段时间来计算吗？
求解，不胜感激！
另外，望推荐一些经典文章和参考资料，中英都可以。还有就就目前酶动力学研究的最新技术和方法，理论也可以推荐。
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1楼 2015-12-15 09:33:28
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匿名
本帖仅楼主可见
2楼2015-12-15 10:14:21
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纳米之心

木虫 (文坛精英)
祝福楼主
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火星人要回火星了！！！
3楼2015-12-15 10:18:06
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scofield111

银虫 (正式写手)
共勉

发自小木虫Android客户端
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4楼2015-12-15 10:19:19
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zxg200910

银虫 (正式写手)

感谢大家的关注，望多多指教，提供帮助和资源！
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5楼2015-12-15 18:09:52
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yyy0305

至尊木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
zxg200910: 金币+2, 太好啦，感谢分享和指导 2015-12-15 23:38:03
initial velocity指的是时间-产物反应曲线最初的一段时间内线性范围内的斜率，不同的酶和底物作用这个时间是不一样的，楼主需要做动力学曲线，即不同浓度的底物和酶反应，每个30S或者1min进行一次检测，持续30min-60min,然后根据时间-产物的反应曲线，确定在多长的时间内所有底物浓度点的曲线是线性的，该斜率即为initial velocity。附件的文档有详细酶Km测定的过程，实际操作，原理方面的推导都有
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  • 附件 1 : ENZYMATIC_ASSAYS.pdf
    • 2015-12-15 21:54:53, 5.62 M
  • 附件 2 : KINETICS_OF_SINGLE-SUBSTRATE_ENZYME_REACTIONS.pdf
    • 2015-12-15 22:02:32, 7.8 M
6楼2015-12-15 22:04:05
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dxs123

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by yyy0305 at 2015-12-15 22:04:05
initial velocity指的是时间-产物反应曲线最初的一段时间内线性范围内的斜率，不同的酶和底物作用这个时间是不一样的，楼主需要做动力学曲线，即不同浓度的底物和酶反应，每个30S或者1min进行一次检测，持续30min-6 ...

谢谢你
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7楼2016-03-24 23:15:25
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春茧春茧

禁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
8楼2016-04-09 19:22:30
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yyy0305

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by 春茧春茧 at 2016-04-09 19:22:30
你好，我初次接触这个，很多还是不了解，方便留个联系方式吗？谢谢...

752897677,有空可以聊聊

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9楼2016-04-09 19:30:07
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