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zxg200910银虫 (正式写手)
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[交流]
酶动力学(enzyme kinetics)
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各位虫友,刚接触酶学,很多疑问,希望前辈们不吝赐教。 学到酶动力学章节是,明白了米氏方程相关假设和推导,但动力学都是考虑的,其他条件pH,T及酶浓度[E]一定,不同底物浓度[S]时(这里并且要求[S]远大于[E])的初速度,但是还是不知道这个“initial velocity”在实际实验中如何测定和确定。本人理解应该是体系单位时间产物的产生量或底物的消耗量(通常用摩尔浓度表示这个量)。但这个单位时间如何设定?看文献,有的用15min内的平均速率表示,有的用60min。不怎么理解?这个初速率不是应该根据不同[s]体系,产物随时间的变化曲线,根据初始线性那一段时间来计算吗? 求解,不胜感激! 另外,望推荐一些经典文章和参考资料,中英都可以。还有就就目前酶动力学研究的最新技术和方法,理论也可以推荐。 |
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2楼2015-12-15 10:14:21
纳米之心
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zxg200910
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zxg200910: 金币+2, 太好啦,感谢分享和指导 2015-12-15 23:38:03
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zxg200910: 金币+2, 太好啦,感谢分享和指导 2015-12-15 23:38:03
| initial velocity指的是时间-产物反应曲线最初的一段时间内线性范围内的斜率,不同的酶和底物作用这个时间是不一样的,楼主需要做动力学曲线,即不同浓度的底物和酶反应,每个30S或者1min进行一次检测,持续30min-60min,然后根据时间-产物的反应曲线,确定在多长的时间内所有底物浓度点的曲线是线性的,该斜率即为initial velocity。附件的文档有详细酶Km测定的过程,实际操作,原理方面的推导都有 |
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2015-12-15 21:54:53, 5.62 M
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dxs123
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7楼2016-03-24 23:15:25
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