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txyu

金虫 (小有名气)

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[求助] HPLC液相色谱图基线问题已有2人参与

1200HPLC液相，开启软件平衡柱子时出现如下谱图，基线呈规律波动
排查原因：
1.进气泡 purge后情况未改观;
2.柱头或管路污染用异丙醇冲洗各相100%洗脱 purge时压力忽高忽低，甚至大于400,仪器报警，抑或70左右。怀疑混合管路有污染，各项25%异丙醇洗脱40min,换超纯水洗脱1h，换50%甲醇，0.4ml/min洗脱4h.
情况未改观，会是什么原因呢？求大神指导

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选择比毅力更重要

1楼2015-12-14 20:46:25

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魔术

金虫 (知名作家)

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引用回帖:

22楼: Originally posted by txyu at 2015-12-18 20:04:08
嗯，想请教一下，建立一个新的液相含测方法，对基线分离有什么要求吗？我的化合物最高响应值在35mAu，基线飘在1mAu，这算是基线分离了吗？
...

　基线分离是指两个峰之间有一段非常接近零，或者已达到零的基线．这段归零的基线可能非常非常短，而分离度达不到要求．
　分离度嘛，一般要求要达到1.5。药典要求R大于等于1.5，理论上有切线法，半峰宽法等等计算法，现实中上头老板看看谱图说可以就可以。

以上是查的，我也不是很了解基线分离，但是根据查到的来看，你说的那个，基线漂和响应最高值，这不算基线分离。基线分离是两个峰之间，不算基线和最高响应峰之间。再说出谱图的时候稍微调节一下信号高度，1mAu相对于35mAu的漂移估计是看不出来的。