8楼: Originally posted by yvonne9044 at 2015-12-15 22:31:12
有转录组就不用做race了吧？我就用转录组数据设计的引物

11楼: Originally posted by crab1983 at 2016-02-23 10:32:55
请问您是怎么做的。我这个基因克隆出来就只是转到拟南芥中，做个鉴定，需要他能在拟南芥中表达就行了。...

13楼: Originally posted by yvonne9044 at 2016-02-23 12:01:09
咱俩做的差不多，你问哪一部分怎么做
...

14楼: Originally posted by crab1983 at 2016-02-24 08:41:56
我这个课题刚下来，现在我们组的人给我提供了我要克隆的基因的，转录组的数据，就是这个基因的cDNA序列。所以我现在就是要设计引物。...

3楼: Originally posted by stone2239 at 2015-12-15 11:48:44
先用你的序列做blastx，看是否含有完整ORF，看编码区的具体位置，然后再根据你的需要设计引物，做定量的话，不需要有完整ORF，但是如果做表达研究功能，那需要有完整ORF，如没有，就做RACE扩全长。

16楼: Originally posted by crab1983 at 2016-03-11 15:18:01
用blastx怎么能看出我的序列是不是完整的ORF呀。...

3楼: Originally posted by stone2239 at 2015-12-15 11:48:44
先用你的序列做blastx，看是否含有完整ORF，看编码区的具体位置，然后再根据你的需要设计引物，做定量的话，不需要有完整ORF，但是如果做表达研究功能，那需要有完整ORF，如没有，就做RACE扩全长。

10楼: Originally posted by crab1983 at 2016-02-23 10:25:15
我这个基因是植物光合作用过程中的酶，理论上转到拟南芥中应该能提高拟南芥的光合速率。...