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yanyanjc

捐助贵宾 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】RNA提取问题

使用invitrogen TRIZOL一步法提取提取-80度保存的南美白对虾头胸甲总RNA 。自认为从液氮研磨到DEPC水回溶都操作正确。电泳检测RNA稀释为x10 x20 x50倍(1ulRNA 加入9、19、49uldepc处理过的水中)。1电压50v 电流99mA 20min 但是检测结果:
第一个样x10的胶孔处出现一条带,其余没有。x20和x50什么都没有
第二个样x10出现拖带  x20如第一个样的x10的一样 胶孔附近出现一条带 x50没有东西
Marker 跑的很正常。

    想请教各位大虾,这说明什么问题 是RNA降解了还是根本就把RNA在某一步操作中丢了。
   
    请各位大虾不吝赐教!!!
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1.01
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★ ★
yanyanjc(金币+3,VIP+0):谢了 3-10 12:22
好低的电压……
我都100V跑(1%的胶)
干嘛要稀释再跑胶?我从来不稀释……
DEPC水溶解也只用20ul
2楼2008-09-21 23:28:54
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yanyanjc

捐助贵宾 (小有名气)

写错了 电压是150v
1.01
3楼2008-09-21 23:47:30
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★ ★
yanyanjc(金币+3,VIP+0):谢谢
别稀释啦
同时也测下OD,看看到底有没有提好
4楼2008-09-21 23:49:53
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