24小时热门版块排行榜    

查看: 1070  |  回复: 8
当前主题已经存档。

7961243

金虫 (正式写手)

[交流] 关于小目的片段酶切后纯化的问题

胶回收了三次都没回收到目的片段-----
我的目的片段只有90bp.酶切后去掉几个保护性碱基剩下也就八十几个bp,每次电泳纯化后胶回收总是看不到带,全丢失掉了,可能是片段太小。请问,除电泳外有什么方法去除酶切后多余的酶来纯化目的片段?谢谢。

[ Last edited by 350784478 on 2009-9-19 at 13:11 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biocore

溶胶,然后加同等体积异丙醇,过柱。
洗涤液,也加同等体积异丙醇。
回收。
2楼2008-09-21 21:39:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snzydong

铁杆木虫 (著名写手)

你如果带比较单一可一试一试 片段纯化试剂盒 不用切胶 直接回收 去除酶残留
3楼2008-09-22 09:55:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sumertansy

铜虫 (小有名气)

你是PCR产物酶切,可以反应体系直接回收,不用胶回收。
4楼2008-09-25 21:54:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

GinTonic

金虫 (小有名气)

直接酚氯仿抽提异丙醇沉淀吧
5楼2008-09-26 14:38:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

meizihan

新虫 (初入文坛)

换个试剂盒

换个试剂盒试试。
6楼2008-09-26 16:27:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

白利利

铜虫 (小有名气)

加入总浓度20%的异丙醇
天道酬勤
7楼2009-05-04 19:36:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoli12

木虫 (正式写手)


1,直接六十度灭活酶(每种酶的灭活温度不同)进行连接。
2,一般胶回收试剂盒,溶解上柱后,离心速递降到4000以下。其他各部相同。
8楼2009-05-04 19:53:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

买专门的试剂盒,要不就先用灭活的方法把酶灭了然后沉淀,也有一些核酸共沉淀剂的,沉淀率高一点
9楼2009-05-04 20:03:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 7961243 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 306分材料调剂 +3 chuanzhu川烛 2026-03-01 4/200 2026-03-01 12:32 by houyaoxu
[考研] 272求调剂 +5 材紫有化 2026-02-28 5/250 2026-03-01 11:51 by gaoxiaoniuma
[考研] 材料284求调剂,一志愿郑州大学英一数二 +7 想上岸的土拨鼠 2026-02-28 7/350 2026-03-01 11:44 by 月下best
[考研] 求调剂 +5 repeatt?t 2026-02-28 5/250 2026-03-01 11:43 by 王伟要上岸啊
[考研] 高分子化学与物理调剂 +5 好好好1233 2026-02-28 9/450 2026-03-01 10:59 by fengyu211
[考研] 寻找调剂 +4 LYidhsjabdj 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:56 by sunny81
[考研] 311求调剂 +9 南迦720 2026-02-28 10/500 2026-03-01 10:55 by sunny81
[考研] 291分工科求调剂 +7 science饿饿 2026-03-01 8/400 2026-03-01 10:43 by sunny81
[硕博家园] 博士自荐 +6 科研狗111 2026-02-26 10/500 2026-03-01 10:02 by 科研狗111
[论文投稿] 求助coordination chemistry reviews 的写作模板 10+3 ljplijiapeng 2026-02-27 4/200 2026-03-01 09:07 by babero
[考研] 285求调剂 +6 满头大汗的学生 2026-02-28 6/300 2026-03-01 06:29 by Trying]
[考研] 材料调剂 +4 爱擦汗的可乐冰 2026-02-28 4/200 2026-03-01 00:38 by 猫猫球alter
[考研] 307求调剂 +4 73372112 2026-02-28 6/300 2026-03-01 00:04 by ll247
[考博] 26申博 +4 想申博! 2026-02-26 4/200 2026-02-28 21:37 by limorning
[考研] 264求调剂 +3 巴拉巴拉根556 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:31 by gaoxiaoniuma
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
[考研] 0856材料求调剂 +10 hyf hyf hyf 2026-02-28 11/550 2026-02-28 18:50 by 无际的草原
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
[考研] 304求调剂 +5 曼殊2266 2026-02-28 6/300 2026-02-28 12:44 by 迷糊CCPs
[基金申请] 面上可以超过30页吧? +12 阿拉贡aragon 2026-02-22 13/650 2026-02-26 22:09 by Hahaxia
信息提示
请填处理意见