应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于小目的片段酶切后纯化的问题
91/1返回列表
查看: 1095  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

7961243

金虫 (正式写手)

[交流] 关于小目的片段酶切后纯化的问题

胶回收了三次都没回收到目的片段-----
我的目的片段只有90bp.酶切后去掉几个保护性碱基剩下也就八十几个bp,每次电泳纯化后胶回收总是看不到带，全丢失掉了，可能是片段太小。请问，除电泳外有什么方法去除酶切后多余的酶来纯化目的片段？谢谢。

[ Last edited by 350784478 on 2009-9-19 at 13:11 ]
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2008-09-21 19:46:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biocore

溶胶，然后加同等体积异丙醇，过柱。
洗涤液，也加同等体积异丙醇。
回收。
赞一下 回复此楼
2楼2008-09-21 21:39:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snzydong

铁杆木虫 (著名写手)
你如果带比较单一可一试一试 片段纯化试剂盒 不用切胶 直接回收 去除酶残留
赞一下 回复此楼
3楼2008-09-22 09:55:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sumertansy

铜虫 (小有名气)
你是PCR产物酶切，可以反应体系直接回收，不用胶回收。
赞一下 回复此楼
4楼2008-09-25 21:54:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

GinTonic

金虫 (小有名气)
直接酚氯仿抽提异丙醇沉淀吧
赞一下 回复此楼
5楼2008-09-26 14:38:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

meizihan

新虫 (初入文坛)

换个试剂盒

换个试剂盒试试。
回复此楼
6楼2008-09-26 16:27:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

白利利

铜虫 (小有名气)
加入总浓度20%的异丙醇
赞一下 回复此楼
天道酬勤
7楼2009-05-04 19:36:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoli12

木虫 (正式写手)
，
1，直接六十度灭活酶（每种酶的灭活温度不同）进行连接。
2，一般胶回收试剂盒，溶解上柱后，离心速递降到4000以下。其他各部相同。
赞一下 回复此楼
8楼2009-05-04 19:53:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
买专门的试剂盒，要不就先用灭活的方法把酶灭了然后沉淀，也有一些核酸共沉淀剂的，沉淀率高一点
赞一下 回复此楼
9楼2009-05-04 20:03:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 7961243 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 333求调剂 +6 87639 2026-03-21 11/550 2026-03-25 16:17 by 87639
[考研] 材料学硕333求调剂 +4 北道巷 2026-03-24 4/200 2026-03-25 14:16 by mapenggao
[考研] 0854人工智能方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-24 4/200 2026-03-25 13:29 by 2177681040
[考研] 293求调剂 +7 加一一九 2026-03-24 7/350 2026-03-25 12:02 by userper
[考研] 一志愿 西北大学 ，070300化学学硕，总分287，双非一本，求调剂。 +4 晨昏线与星海 2026-03-20 4/200 2026-03-25 10:16 by allen-yin
[考研] 一志愿中南大学化学学硕0703总分337求调剂 +6 niko- 2026-03-22 6/300 2026-03-25 09:14 by aa331100
[考研] 上海电力大学材料防护与新材料重点实验室招收调剂研究生（材料、化学、电化学，环境） +4 我爱学电池 2026-03-23 4/200 2026-03-25 00:59 by 1027_324
[考研] 材料学求调剂 +6 Stella_Yao 2026-03-20 6/300 2026-03-25 00:37 by baoball
[考研] 08工学调剂 +12 用户573181 2026-03-20 17/850 2026-03-24 21:45 by 番茄炖了西红柿
[考博] 申博26年 +4 八6八68 2026-03-19 4/200 2026-03-24 15:49 by 小Ben呵呵
[考研] 一志愿陕师大生物学071000，298分，求调剂 +3 SYA！ 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:09 by macy2011
[考研] 333求调剂 +3 ALULU4408 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:04 by macy2011
[论文投稿] 急发核心期刊论文 +3 贤达问津 2026-03-23 5/250 2026-03-23 17:13 by 妹子不好惹
[考研] 293求调剂 +3 涛涛Wjt 2026-03-22 5/250 2026-03-22 22:21 by jiangpengfei
[考研] 寻找调剂 +4 倔强芒? 2026-03-21 4/200 2026-03-22 16:14 by 木托莫露露
[考研] 303求调剂 +5 安忆灵 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:46 by 素颜倾城1988
[基金申请] 学校已经提交到NSFC，还能修改吗？ 40+4 babangida 2026-03-19 9/450 2026-03-21 16:12 by babangida
[考研] 南昌大学材料专硕311分求调剂 +6 77chaselx 2026-03-20 6/300 2026-03-21 07:24 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西南交通 专硕 材料355 本科双非 求调剂 +5 西南交通专材355 2026-03-19 5/250 2026-03-20 21:10 by JourneyLucky
[考研] 一志愿吉林大学材料学硕321求调剂 +11 Ymlll 2026-03-18 15/750 2026-03-20 19:40 by 丁丁*
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭