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20095173

至尊木虫 (正式写手)

[求助] 蛋白质结构检测

各位师兄师姐大家好!
       我有一个问题想咨询一下大家,
       1、我想请问哪一种方法可以检测蛋白质的结构(空间结构解析),就是说,知道哪个氨基酸在哪个位置,哪个活性位点在哪个位置都能检测出来。
       2、我想请问如果,蛋白质发生了变性、或者是降解,请问有没有手段表征蛋白质的几级结构发生了变化,是高级结构发生了变化,还是低级结构发生了变化;
       3、我想请问一下,金属离子使蛋白质变性,其原理是什么,比如说重金属。和蛋白质哪个位点结合?结合之后破坏的是什么结构?为什么重金属离子加入蛋白质溶液之后会生成沉淀?
       谢谢大家!
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zwl9426

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

楼主你好 我是刚刚接触蛋白质,问你一个问题好不好。就是我现在做的是蛋白质折叠的实验,用荧光检测,我用的样品是pmp22膜蛋白,现在的问题是我溶解不了这个膜蛋白,用了很多方法也不行,请教一下你,有没有什么方法可以参考。谢谢了
3楼2016-03-31 14:45:14
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扶正2013

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
20095173: 金币+10, 博学EPI+1, 有帮助, 知道了很多以前不知道的信息,谢谢你! 2015-12-13 09:08:01
问题1: 测定蛋白质结构主要有三种方法:X-射线,NMR,和冷冻电镜,第一种方法需要得到蛋白质晶体,其他两种方法不需要,但成本较高。要找到活性位点,可以做蛋白质与配体的复合物的共结晶。

问题2: 园二色谱(CD谱)可以用来分析蛋白质二级结构的变化。

问题3: 金属离子使蛋白质变性可能是由于金属离子与催化残基的功能团进行螯合,从而使蛋白质变性。不同的重金属,其结合位点也不一样。例如,汞与Cys中的S原子以共价键结合,有时会与His, Arg等以非共价键相结合;铂可以与Cys, His, Lys, Met和Arg形成稳定的化合物。

希望我的回答让你满意。

祝好!
2楼2015-12-12 14:39:23
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