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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 同源重组的方法敲除目的基因
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远丽123

金虫 (小有名气)
用于下游表达是什么意思？？？

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11楼2015-12-11 10:18:24
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远丽123

金虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by charles08 at 2015-12-11 08:23:11
如果 是用于下游表达，剩余的碱基有错误的那么最好是重新构建
本人论文期间是吃过亏的，非常浪费时间，出了问题排查问题得花不少时间...

用于下游表达是什么意思呢 不太懂  我的目的就是想把这个基因敲掉 看看菌体形态等什么的有没有变化

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12楼2015-12-11 10:29:38
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阿外国本

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

看看这个错配影不影响蛋白序列，如果不影响就没关系

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13楼2015-12-12 19:27:24
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远丽123

金虫 (小有名气)
多谢多谢

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14楼2015-12-12 20:43:43
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月淡风轻

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

应该没事，我们经常敲除，扩臂都不用高保真酶
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15楼2015-12-12 23:09:14
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看沉思录

铁虫 (小有名气)
多了一个碱基，那表达比突变影响还大吧，移码突变了。后面所有的氨基酸都变了，点突变影响的还只是一个氨基酸
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QQ 2644862520承接整体课题服务，包括课题设计、实验实施、论文服务
16楼2015-12-16 14:42:31
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jiayi2013

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by charles08 at 2015-12-11 08:23:11
如果 是用于下游表达，剩余的碱基有错误的那么最好是重新构建
本人论文期间是吃过亏的，非常浪费时间，出了问题排查问题得花不少时间...

请问你做过基因敲除吗？能留下QQ吗？本人也在做基因敲除，想请教些问题。。
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17楼2016-06-08 15:53:59
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黄小萌萌

银虫 (小有名气)
应该没问题

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18楼2016-06-09 22:36:36
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LIN琳LIN

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by shengliding at 2015-12-10 08:32:02
用于基因敲除没问题。你关注的是目的基因去除，一个碱基不会影响同源重组；一般情况下，你敲除的基因与其临近的基因应该有一定的距离，其上游和下游片段（也就1kb吧）应该只关系到目标基因，那单碱基的改变不应影响 ...

您好，我也在做基因敲除，请问我所设计的上下游同源臂中需要带一部分目的基因吗？谢谢！
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19楼2016-09-08 15:48:43
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