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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 细菌RT-PCR引物设计
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zoenic

铁虫 (初入文坛)

[求助] 细菌RT-PCR引物设计 已有1人参与

做细菌几个基因的相对定量PCR，用SYBGreen法，现在要设计引物，但在NCBI上查不到该基因的mRNA序列，已知普通PCR的引物序列，能用来做逆转录吗？
还有，我查了资料，设计引物要尽量跨内含子，原核生物mRNA没有内含子，是不是不用考虑这些？
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1楼 2015-12-08 14:42:49
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zoenic

铁虫 (初入文坛)
仔细想了想，我做的是两步法，RNA首先逆转录成cDNA，再扩增，所以只要根据cDNA序列来设计引物就可以了？
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2楼2015-12-08 14:48:03
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guoqin_shiyin

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by zoenic at 2015-12-08 14:48:03
仔细想了想，我做的是两步法，RNA首先逆转录成cDNA，再扩增，所以只要根据cDNA序列来设计引物就可以了？

细菌没有內含子，直接按照dna序列设计就好

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3楼2016-01-15 21:31:04
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