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zoenic

铁虫 (初入文坛)

[求助] 细菌RT-PCR引物设计 已有1人参与

做细菌几个基因的相对定量PCR,用SYBGreen法,现在要设计引物,但在NCBI上查不到该基因的mRNA序列,已知普通PCR的引物序列,能用来做逆转录吗?
还有,我查了资料,设计引物要尽量跨内含子,原核生物mRNA没有内含子,是不是不用考虑这些?
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zoenic

铁虫 (初入文坛)

仔细想了想,我做的是两步法,RNA首先逆转录成cDNA,再扩增,所以只要根据cDNA序列来设计引物就可以了?
2楼2015-12-08 14:48:03
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guoqin_shiyin

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by zoenic at 2015-12-08 14:48:03
仔细想了想,我做的是两步法,RNA首先逆转录成cDNA,再扩增,所以只要根据cDNA序列来设计引物就可以了?

细菌没有內含子,直接按照dna序列设计就好

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2016-01-15 21:31:04
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