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iamliyang91

木虫 (小有名气)

[交流] RAW264.7细胞培养已有7人参与

小弟现在刚开始培养RAW264.7小鼠巨噬细胞,听一些过来人建议,该细胞不能使用胰酶消化,否则细胞容易分化,于是采用无胰酶的EDTA消化液,浓度为万分之二,结果传代时加了2mL消化液,几分钟过去,细胞依旧贴壁,最后不得不用PBS使劲将细胞吹下。不知各位养过该细胞的大神们是怎么消化这种细胞的,麻烦传点宝贵经验,感激不尽!!
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wrjjr

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by iamliyang91 at 2015-12-18 22:47:30
谢谢了,主要是这个细胞不能用胰酶消化,我现在提高了edta消化液的浓度,现在可以消化了! 非常感谢哦!
...

我想问下,你提高了之后浓度是多少啊,我也在养这个细胞

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10楼2017-06-11 15:25:26
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普通回帖

yjhuan

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
先加1ml胰酶,稍微润洗一下,吸掉,再加新的进去,会好消化一点
2楼2015-12-16 20:45:19
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iamliyang91

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yjhuan at 2015-12-16 20:45:19
先加1ml胰酶,稍微润洗一下,吸掉,再加新的进去,会好消化一点

谢谢了,主要是这个细胞不能用胰酶消化,我现在提高了edta消化液的浓度,现在可以消化了! 非常感谢哦!

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3楼2015-12-18 22:47:30
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lwljxbj

至尊木虫 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
这种细胞应该用细胞刮子吧?

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4楼2015-12-18 23:06:53
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三木山

银虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我直接用的胰酶,会长一些触角

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5楼2015-12-18 23:31:51
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iamliyang91

木虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by lwljxbj at 2015-12-18 23:06:53
这种细胞应该用细胞刮子吧?

嗯,ACTT推荐的是用细胞刮.

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6楼2015-12-19 10:59:19
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iamliyang91

木虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 三木山 at 2015-12-18 23:31:51
我直接用的胰酶,会长一些触角

就是,巨噬细胞很容易活化,活化的细胞太多会影响实验结果.

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7楼2015-12-19 11:01:07
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三木山

银虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
或者直接用不含血清的培养基洗

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8楼2015-12-19 13:39:51
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iamliyang91

木虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 三木山 at 2015-12-19 13:39:51
或者直接用不含血清的培养基洗

嗯,试了一下,确实可以.

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9楼2015-12-20 01:12:23
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