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被镌刻的时光

新虫 (小有名气)

[求助] 色谱条件摸索 已有4人参与

柱子:2.1*100,1.7um,流速:0.3ml/min
流动相为70:30(5%异丙醇/乙腈:水)时,第2个和第3个峰即α-亚麻酸和γ-亚麻酸的2-硝基苯肼衍产物分离度达到1.55,但最后两个峰即二十二碳五烯酸和亚油酸的衍生产物就重叠,当流动相为85:(5%异丙醇/乙腈:水)时,二十二碳五烯酸和亚油酸的衍生产物分离度为1.45,我已调过梯度,首先保证第2个和第3个峰的分离度,后面无论如何调梯度,最后来那个两个峰即二十二碳五烯酸和亚油酸的衍生产物均是重叠,请问如何改变条件可以提高分离度
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被镌刻的时光

新虫 (小有名气)

引用回帖:
21楼: Originally posted by liguoao at 2015-12-11 13:14:50
降低流速,增加样品中的水相,提高柱温

柱温提高了(从20-50),分离度是降低并没有提高.流速以前试过1.0*100mm的0.07流速,但老师觉得流速太低,也试过2.1*100mm流速试过0.1-0.4均不行,等度时乙腈比例低一点,α-亚麻酸和γ-亚麻酸衍生产物分得开,但二十二碳五烯酸-和亚油酸衍生产物分不开,高一点,结果相反;用梯度时,首先保证α-亚麻酸和γ-亚麻酸衍生产物分得开,但后面提高乙腈比例时,二十二碳五烯酸-和亚油酸衍生产物重叠。
22楼2015-12-12 11:10:17
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查看全部 22 个回答

鸭绿江畔

铁杆木虫 (著名写手)

牛B

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
调整流速,调整柱温。
我那么努力,就是为了在更高的层次遇见你!
2楼2015-12-07 10:48:06
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被镌刻的时光

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 鸭绿江畔 at 2015-12-07 10:48:06
调整流速,调整柱温。

流速试过0.2和0.4效果不大,柱温我倒是没设定那谢谢我先试试,柱温影响会很明显吗?
3楼2015-12-07 11:16:35
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鸭绿江畔

铁杆木虫 (著名写手)

牛B

引用回帖:
3楼: Originally posted by 被镌刻的时光 at 2015-12-07 11:16:35
流速试过0.2和0.4效果不大,柱温我倒是没设定那谢谢我先试试,柱温影响会很明显吗?...

UPLC的流速,0.01都成。我做过其他物质的分析,柱温有很大影响。
我那么努力,就是为了在更高的层次遇见你!
4楼2015-12-07 12:45:16
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