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被镌刻的时光

新虫 (小有名气)

[求助] 色谱条件摸索 已有4人参与

柱子：2.1*100,1.7um，流速：0.3ml/min
流动相为70：30（5%异丙醇/乙腈：水）时，第2个和第3个峰即α-亚麻酸和γ-亚麻酸的2-硝基苯肼衍产物分离度达到1.55，但最后两个峰即二十二碳五烯酸和亚油酸的衍生产物就重叠，当流动相为85：（5%异丙醇/乙腈：水）时,二十二碳五烯酸和亚油酸的衍生产物分离度为1.45，我已调过梯度，首先保证第2个和第3个峰的分离度，后面无论如何调梯度，最后来那个两个峰即二十二碳五烯酸和亚油酸的衍生产物均是重叠，请问如何改变条件可以提高分离度
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1楼 2015-12-07 10:29:58
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鸭绿江畔

铁杆木虫 (著名写手)

牛B
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3楼: Originally posted by 被镌刻的时光 at 2015-12-07 11:16:35
流速试过0.2和0.4效果不大，柱温我倒是没设定那谢谢我先试试，柱温影响会很明显吗？...

UPLC的流速，0.01都成。我做过其他物质的分析，柱温有很大影响。
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4楼2015-12-07 12:45:16
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鸭绿江畔

铁杆木虫 (著名写手)

牛B
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5楼: Originally posted by 被镌刻的时光 at 2015-12-07 13:16:49
问工程师流速说一般是0.2-0.4比较合适，之前试过内径1mm的柱子，流速0.07，老师都说流速太小了。那对于我这类物质的分析，还有其他建议吗...

1.那就换HPLC做，UPLC其实没法完全替代HPLC。
2.与其这么纠结，还不如改用气相。我不是开玩笑，别过分迷信液相是万能的。
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6楼2015-12-07 13:28:03
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鸭绿江畔

铁杆木虫 (著名写手)

牛B
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9楼: Originally posted by 被镌刻的时光 at 2015-12-08 14:03:44
以前用的HPLC做的，sunfireC18柱做的，没做出来。当时没试过THF 、异丙醇、加盐加减等，但是这些在UPLC上均不做不出来，本来有一段时间异丙醇可以分出来，可现在重复不出来了，所以觉得很奇怪...

你这些东西，我瞅着结构，极性都很小，何不试试XBRIDGE系列的柱子。另外，这些小极性化合物有必要加异丙醇之类的吗？
就像用液相分开，还有正相色谱可用，不过对你的液相损伤会很大。
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10楼2015-12-08 14:58:35
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被镌刻的时光

新虫 (小有名气)
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15楼: Originally posted by 竹水月 at 2015-12-08 16:34:32
弱弱说一句，相同填料的长柱效果能好点不是，实验室有吗？
...

就是没有长一点的了，这根是2.1*100mm的是刚买的，以前试过1.0*100mm的串联是可以，只是内径小压力太大。
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16楼2015-12-08 16:41:40
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鸭绿江畔

铁杆木虫 (著名写手)

牛B

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
调整流速，调整柱温。
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2楼2015-12-07 10:48:06
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被镌刻的时光

新虫 (小有名气)
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2楼: Originally posted by 鸭绿江畔 at 2015-12-07 10:48:06
调整流速，调整柱温。

流速试过0.2和0.4效果不大，柱温我倒是没设定那谢谢我先试试，柱温影响会很明显吗？
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3楼2015-12-07 11:16:35
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被镌刻的时光

新虫 (小有名气)
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4楼: Originally posted by 鸭绿江畔 at 2015-12-07 12:45:16
UPLC的流速，0.01都成。我做过其他物质的分析，柱温有很大影响。...

问工程师流速说一般是0.2-0.4比较合适，之前试过内径1mm的柱子，流速0.07，老师都说流速太小了。那对于我这类物质的分析，还有其他建议吗
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5楼2015-12-07 13:16:49
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被镌刻的时光

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 鸭绿江畔 at 2015-12-07 13:28:03
1.那就换HPLC做，UPLC其实没法完全替代HPLC。
2.与其这么纠结，还不如改用气相。我不是开玩笑，别过分迷信液相是万能的。...

这是我的毕业论文，现已研三，不可能改用气相的，前面也做出了一些东西了额
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7楼2015-12-08 10:49:20
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鸭绿江畔

铁杆木虫 (著名写手)

牛B
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7楼: Originally posted by 被镌刻的时光 at 2015-12-08 10:49:20
这是我的毕业论文，现已研三，不可能改用气相的，前面也做出了一些东西了额...

那就尽快用HPLC试试
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8楼2015-12-08 11:05:15
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被镌刻的时光

新虫 (小有名气)
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8楼: Originally posted by 鸭绿江畔 at 2015-12-08 11:05:15
那就尽快用HPLC试试...

以前用的HPLC做的，sunfireC18柱做的，没做出来。当时没试过THF 、异丙醇、加盐加减等，但是这些在UPLC上均不做不出来，本来有一段时间异丙醇可以分出来，可现在重复不出来了，所以觉得很奇怪
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9楼2015-12-08 14:03:44
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