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被镌刻的时光

新虫 (小有名气)

[求助] 色谱条件摸索 已有4人参与

柱子:2.1*100,1.7um,流速:0.3ml/min
流动相为70:30(5%异丙醇/乙腈:水)时,第2个和第3个峰即α-亚麻酸和γ-亚麻酸的2-硝基苯肼衍产物分离度达到1.55,但最后两个峰即二十二碳五烯酸和亚油酸的衍生产物就重叠,当流动相为85:(5%异丙醇/乙腈:水)时,二十二碳五烯酸和亚油酸的衍生产物分离度为1.45,我已调过梯度,首先保证第2个和第3个峰的分离度,后面无论如何调梯度,最后来那个两个峰即二十二碳五烯酸和亚油酸的衍生产物均是重叠,请问如何改变条件可以提高分离度
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鸭绿江畔

铁杆木虫 (著名写手)

牛B

引用回帖:
9楼: Originally posted by 被镌刻的时光 at 2015-12-08 14:03:44
以前用的HPLC做的,sunfireC18柱做的,没做出来。当时没试过THF 、异丙醇、加盐加减等,但是这些在UPLC上均不做不出来,本来有一段时间异丙醇可以分出来,可现在重复不出来了,所以觉得很奇怪...

你这些东西,我瞅着结构,极性都很小,何不试试XBRIDGE系列的柱子。另外,这些小极性化合物有必要加异丙醇之类的吗?
就像用液相分开,还有正相色谱可用,不过对你的液相损伤会很大。
我那么努力,就是为了在更高的层次遇见你!
10楼2015-12-08 14:58:35
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查看全部 22 个回答

鸭绿江畔

铁杆木虫 (著名写手)

牛B

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
调整流速,调整柱温。
我那么努力,就是为了在更高的层次遇见你!
2楼2015-12-07 10:48:06
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被镌刻的时光

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 鸭绿江畔 at 2015-12-07 10:48:06
调整流速,调整柱温。

流速试过0.2和0.4效果不大,柱温我倒是没设定那谢谢我先试试,柱温影响会很明显吗?
3楼2015-12-07 11:16:35
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鸭绿江畔

铁杆木虫 (著名写手)

牛B

引用回帖:
3楼: Originally posted by 被镌刻的时光 at 2015-12-07 11:16:35
流速试过0.2和0.4效果不大,柱温我倒是没设定那谢谢我先试试,柱温影响会很明显吗?...

UPLC的流速,0.01都成。我做过其他物质的分析,柱温有很大影响。
我那么努力,就是为了在更高的层次遇见你!
4楼2015-12-07 12:45:16
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