24小时热门版块排行榜    

查看: 1047  |  回复: 6
当前主题已经存档。

winnie516

新虫 (初入文坛)

[交流] 关于启动子克隆

我要做的实验是根据已知报道的启动子序列,设计引物,再从另一种植物的基因组DNA中克隆出启动子序列!我看了很多文献,报道的启动子序列与要克隆的序列是同一种植物,而我的是不同的植物,我想知道这样能不能克隆出来想要的那个启动子序列呢?还有做表达载体时很多文献都是将提取的带有报告基因的序列转移到其他植物中看其表达活性,要是还是转移到原来的植物中是否也能看其表达活性?哪位高手帮帮忙?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

annwt

木虫 (正式写手)

启动子克隆方法应该很多了,这应该叫同源克隆,是个快捷的方法,
2楼2008-09-21 07:22:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)

hehe

植物常用的启动子是CaMV病毒的启动子吧。文献中报道的测启动子活性,一般是为了比较启动子表达强度,是否作这类试验,看你的试验目的。现在很多基因组测序了,研究克隆启动子先对简单方便了。单纯的表达基因,个人感觉没大有必要,不过如果是组织特异性或者特殊调控可以分析下。
3楼2008-09-21 19:46:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

winnie516

新虫 (初入文坛)

回复三楼

我研究的植物还没全基因组测序,而且我所研究的启动子是具有组织特异性表达的。虽然启动子的结构好是比较保守的,但我觉得物种还是有些关系,如果用二楼所说的同源克隆,结果会不会不好?
4楼2008-09-22 08:36:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

platanus

木虫 (著名写手)

这个有可能扩增不到,应为如果你扩增的是特异表达的启动子的话,那么在另一个植物里的序列不一定在你的目的植物里面也有一样的序列.另外,转报告基因看活性的话转你的目的植物也是可以看活性的,只是一般别人都是转模式植物的,这样写文章就好说一点而已!如果是特异表达的话,你转目的植物就可以表达得更好了!
5楼2008-10-27 22:20:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

十比

木虫 (著名写手)

我也想克隆一个基因的启动子,即使有全基因组序列,我做了全长,但我不知道启动子应该是转录起始位点上游多少bp呢?  要扩多长才能保证启动子在里面呢?  请高手指点.
6楼2008-10-27 23:29:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 学员pG9gVL 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿武理材料工程348求调剂 +5  ̄^ ̄゜汗 2026-03-19 7/350 2026-03-22 19:44 by 公瑾逍遥
[考研] 308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-21 3/150 2026-03-22 16:54 by i_cooler
[考研] 环境学硕288求调剂 +6 皮皮皮123456 2026-03-22 6/300 2026-03-22 16:52 by i_cooler
[考研] 289求调剂 +7 怀瑾握瑜l 2026-03-20 7/350 2026-03-22 15:57 by ColorlessPI
[考研] 求调剂 +7 Auroracx 2026-03-22 7/350 2026-03-22 12:38 by 素颜倾城1988
[考研] 求调剂 +4 要好好无聊 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:57 by 学员8dgXkO
[考研] 268求调剂 +9 简单点0 2026-03-17 9/450 2026-03-21 15:37 by lature00
[考研] 085601调剂 358分 +3 zzzzggh 2026-03-20 4/200 2026-03-21 10:21 by luoyongfeng
[考研] 南昌大学材料专硕311分求调剂 +6 77chaselx 2026-03-20 6/300 2026-03-21 07:24 by JourneyLucky
[考研] 083200学硕321分一志愿暨南大学求调剂 +3 innocenceF 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:35 by JourneyLucky
[考研] 一志愿中国石油大学(华东) 本科齐鲁工业大学 +3 石能伟 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:22 by JourneyLucky
[考研] 材料专硕英一数二306 +7 z1z2z3879 2026-03-18 7/350 2026-03-20 23:48 by JourneyLucky
[考研] 295求调剂 +4 一志愿京区211 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:41 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +7 司空. 2026-03-18 7/350 2026-03-20 23:08 by JourneyLucky
[考研] 收复试调剂生 +4 雨后秋荷 2026-03-18 4/200 2026-03-18 14:16 by elevennnne
[考研] 277调剂 +5 自由煎饼果子 2026-03-16 6/300 2026-03-17 19:26 by 李leezz
[考研] 一志愿苏州大学材料工程(085601)专硕有科研经历三项国奖两个实用型专利一项省级立项 +6 大火山小火山 2026-03-16 8/400 2026-03-17 15:05 by 无懈可击111
[考研] 一志愿南京大学,080500材料科学与工程,调剂 +4 Jy? 2026-03-16 4/200 2026-03-17 11:02 by gaoqiong
[考研] 275求调剂 +4 太阳花天天开心 2026-03-16 4/200 2026-03-17 10:53 by 功夫疯狂
[考研] 考研调剂 +3 淇ya_~ 2026-03-17 5/250 2026-03-17 09:25 by Winj1e
信息提示
请填处理意见