应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蛋白质——非还原型电泳，包涵体复性
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
31/1返回列表
查看: 1048  |  回复: 2
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

lxl1213

新虫 (小有名气)

[求助] 蛋白质——非还原型电泳，包涵体复性 已有1人参与

包涵体复性遇到许多问题，首先是非还原型电泳，电泳条带为什么老是中间有个洞啊，如图片所示，同一个样品，第一条道是还原型的，第二条道是非还原型的，为什么会这样。
然后第二个问题，包涵体蛋白复性，我的包涵体溶解液为8M尿素，100mM磷酸二氢钠，10mM Tris-cl，pH 8.5,基础复性液是50mM Tris-cl，2mM EDTA, pH 8.5，问题来了，我把包涵体溶液一滴入复性液中就会出现沉淀，而直接滴入蒸馏水中反而没有什么沉淀，是什么问题呢？

蛋白质——非还原型电泳，包涵体复性
BD1183FD-17A0-4CB4-B474-765E3114DB74.png
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-12-03 12:07:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

总有二狗咬朕

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

出现蛋白析出，肯定是条件变化太剧烈了。
复性应该采取复性液浓度和PH值逐渐变化的方法，例如根据包涵体的溶液成分，每隔1个PH或浓度值配置一种溶液，逐步透析到正常。此外透析时必须浓度极低，条件温和，使蛋白质能够正确折叠。但是复性的比率应该很低。
若加变性剂尿素可加到2M，盐酸胍可加到1-1.5M；
另外可将甘油浓度增加，范围可在≤30%，且在复性样品中也可加适量甘油。给你推荐个文章感觉两篇差不多都可以看看包涵体复性常见问题和蛋白质复性常见问题
赞一下(1人) 回复此楼
我好累，承受这个年纪不该有的帅！
2楼2016-01-14 11:34:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dushangyun

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 总有二狗咬朕 at 2016-01-14 11:34:08
出现蛋白析出，肯定是条件变化太剧烈了。
复性应该采取复性液浓度和PH值逐渐变化的方法，例如根据包涵体的溶液成分，每隔1个PH或浓度值配置一种溶液，逐步透析到正常。此外透析时必须浓度极低，条件温和，使蛋白质 ...

大师，可以把文章给我转发一下吗？
赞一下 回复此楼
经不住逝水流年，逃不过此间少年
3楼2016-06-27 09:28:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 lxl1213 的主题更新
31/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料调剂 +17 小刘同学吖吖 2026-04-06 18/900 2026-04-07 11:41 by 诗与自由
[考研] 一志愿华东理工085601材料工程303分求调剂 +8 a1708 2026-04-06 8/400 2026-04-07 11:20 by 诗与自由
[考研] 297分083200求助 +9 aekx 2026-04-05 9/450 2026-04-06 20:57 by flysky1234
[考研] 305求调剂 +3 77Qi 2026-04-06 3/150 2026-04-06 15:36 by going home
[考研] 化学调剂 +17 艾志恒 2026-04-03 18/900 2026-04-06 07:10 by jj987
[考研] 085500机械专硕初试288求调剂 +3 GZJguo666- 2026-04-05 3/150 2026-04-05 18:06 by jkddd
[考研] 344材料与化工调剂 +9 调剂上岸玘 2026-04-03 9/450 2026-04-04 23:10 by happyddm
[考研] 413求调剂 +4 柯某某 2026-03-31 4/200 2026-04-04 22:18 by 学员6BFVa3
[考研] 325求调剂 +4 春风不借意 2026-04-04 4/200 2026-04-04 22:08 by 啵啵啵0119
[考研] 0835学硕299求调剂 08大类可接受 +5 useryy 2026-04-03 5/250 2026-04-04 20:07 by 蓝云思雨
[考研] 309分085801求调剂 +11 MY_angel 2026-03-31 11/550 2026-04-04 19:11 by 蓝云思雨
[考研] 272求调剂 +4 松柏常青5 2026-04-03 4/200 2026-04-04 17:03 by babysonlkd
[考研] 材料295 +13 小英11 2026-04-03 14/700 2026-04-04 09:02 by 来看流星雨10
[考研] 数二英二348求调剂 +4 hxdzj1 2026-04-03 5/250 2026-04-03 21:25 by zhq0425
[基金申请] esi高被引论文是不是能对中标有所加分和帮助呢 +5 redcom 2026-04-01 6/300 2026-04-03 15:15 by Howard28
[考研] 071000生物学调剂 +8 知昭蔓 2026-04-02 8/400 2026-04-03 10:36 by macy2011
[考研] 260求调剂 +3 朱芷琳 2026-04-02 3/150 2026-04-03 08:44 by yulian1987
[考研] 312求调剂 +6 小小墨123 2026-04-02 7/350 2026-04-03 07:32 by jsw79
[考研] 求调剂0703 +5 周嘉尧 2026-03-31 8/400 2026-04-01 20:32 by ltltkkk
[考研] 一志愿北京科技大学085601材料工程英一数二初试总分335求调剂 +5 双马尾痞老板2 2026-03-31 5/250 2026-04-01 09:04 by oooqiao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭