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急求助：酪蛋白溶解的问题
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我要测多种蛋白酶的活性，用酪蛋白做底物，但底物溶解是遇到难题了向各位xdjm求教 现在测木瓜蛋白酶的酶活，按国标的方法是先把酪蛋白溶解在0.05 mol/L的磷酸氢二钠溶液（约0.7%），再用1mol/L HCl调pH=7.0，然后定容。但酪蛋白加进去后，怎么加热都还有大量絮状沉淀，而且溶液颜色变成亮棕色。按别人的建议，加了少量NaOH，倒是很快溶解，可是加HCl调pH过程中，pH降到9.0以下就有沉淀析出了。 酪蛋白的等电点是4.7，理论上讲在0.05M的磷酸二氢钠溶液（pH=9.4）里是可溶的啊，究竟是怎么回事呢？ 其他蛋白酶还没有开始做，我想调整底物缓冲液pH值得时候肯定也会遇到同样的问题吧 求各位大大指教。 [ Last edited by zhangkii on 2008-9-18 at 22:09 ] |
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