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熙利十六

银虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白纯化问题 已有1人参与

各位虫友，本人有一现象无法解释，请求赐教！本人用蛋白纯化仪纯化蛋白，咪唑洗涤浓度为40mM，洗脱浓度为500mM；红色箭头标记为目的蛋白，HIS标签，大小37KD；绿色箭头标记为杂蛋白，大小约14KD；本人用镍柱纯化也一直有这个杂蛋白，做WB发现杂蛋白可以目的蛋白制备的抗体结合（前面师姐纯化得到的，抗体较纯，我现在是重复她的实验，但是就是一直有那条带，师姐纯化时没有），也可以和his抗体结合。请赐教！谢谢

蛋白纯化问题
11.png
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1楼 2015-11-30 19:05:15
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old_yang

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
仔细查看实验记录，比较你们两人的操作步骤，记录用的溶液，或者加一个空白对照，看看是哪一步引入的。

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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

熙利十六
2楼2015-11-30 19:09:22
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熙利十六

银虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by old_yang at 2015-11-30 19:09:22
仔细查看实验记录，比较你们两人的操作步骤，记录用的溶液，或者加一个空白对照，看看是哪一步引入的。

谢谢，按我师姐的步骤已经纯化很多次了，每次都有那条带，用的载体是pET-30a表达载体
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3楼2015-11-30 19:45:24
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大陆2014
就

发自小木虫Android客户端
4楼2015-11-30 19:47:39
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puma2003

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 熙利十六 at 2015-11-30 19:45:24
谢谢，按我师姐的步骤已经纯化很多次了，每次都有那条带，用的载体是pET-30a表达载体...

换别的实验室的新的pet-30a 试试
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5楼2015-12-01 14:57:04
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cxy8023

银虫 (初入文坛)
解决了吗 我也出现了这样的问题耶
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路漫漫其修远兮吾将上下而求索
6楼2015-12-25 10:10:14
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cxy8023

银虫 (初入文坛)
解决了吗 我也出现这样问题耶  你怎么解决的
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路漫漫其修远兮吾将上下而求索
7楼2015-12-25 10:10:56
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