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请教各位：双酶切切不开怎么会事？怎么办？
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我用kpn1和Hind3双酶切一个质粒，酶切6小时后电泳，总出现一条质粒带，如果能切开，应该是两条带的啊，请问什么原因？如何解决？谢谢！ （因为这个质粒是我构建的的一个质粒，连上了我的一段目的基因，想双酶切验证一下目的基因是否已连上，但总切不开，急！） |
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从来没用过生工的酶，它们给提供什么样的buffer也不清楚 给你提供下列体系供参考： 1.NEB Enzyme Supplied NEBuffer % Activity in NEBuffers 1 2 3 4 Hind III 2 50 100 10 50 Kpn I 1 + BSA 100 75 0 50 建议使用buffer2+BSA 2.Takara 在各种Universal Buffer中的相对活性： L M H K T(+BSA) Hind III (60) 100 ＜20 200 (100) Kpn I 100 60 ＜20 ＜20 (100) 建议使用buffer M 也就是说如果你用生工的酶，应该选择它们提供的中盐buffer进行酶切 应该就是随HindIII提供的那个buffer |
11楼2008-09-20 11:32:19
2楼2008-09-18 20:52:36
3楼2008-09-18 22:06:51
4楼2008-09-18 22:07:02
