应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 为何WB结果marker处有很亮的带？
71/1返回列表
查看: 4862  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

MIMPI

新虫 (初入文坛)

[求助] 为何WB结果marker处有很亮的带？ 已有1人参与

用HIS-tag单抗来鉴定带his标签的表达蛋白，但是WB结果出现多条较淡的带，且Marker处有几条较亮的带。哪位大神可以帮我解释下这是为什么？为什么用his单抗可是特异性还不好？

注：用的一抗二抗都是进口的，没问题。HIS单抗1:10000稀释，二抗1:5000稀释
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-11-30 14:52:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhongli12sk

新虫 (初入文坛)
是不是污染了？！

发自小木虫Android客户端
回复此楼
2楼2015-11-30 23:07:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

生科深似海

新虫 (小有名气)
虽说是进口的  但是国内的代理商不靠谱啊 很多抗体到手里都不靠谱了  建议更换抗体

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2015-11-30 23:09:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海底刚琴

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
MIMPI: 金币+1, ★★★★★最佳答案 2015-12-02 12:01:23
maker 本身也是用His标签纯化的蛋白制作成的，用His抗体去孵育WB膜现出maker这很正常。
赞一下 回复此楼
生活总是有那么多门槛，一口气跨过去就好了。
4楼2015-12-01 20:05:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

MIMPI

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 海底刚琴 at 2015-12-01 20:05:29
maker 本身也是用His标签纯化的蛋白制作成的，用His抗体去孵育WB膜现出maker这很正常。

原来是这样！非常感谢！

那请问结果特异性不强的原因可能是什么？
赞一下 回复此楼
5楼2015-12-02 12:01:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海底刚琴

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by MIMPI at 2015-12-02 12:01:01
原来是这样！非常感谢！

那请问结果特异性不强的原因可能是什么？...

结果特异性不强是指有杂带出现，背景深，还是指目的条带不显著？前两个是可能是膜没有封闭好、抗体特异性不好、IP的单抗、蛋白降解或修饰，后一个和抗体浓度、孵育时间、蛋白本身的量有关。
赞一下 回复此楼
生活总是有那么多门槛，一口气跨过去就好了。
6楼2015-12-09 21:21:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海底刚琴

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by MIMPI at 2015-12-02 12:01:01
原来是这样！非常感谢！

那请问结果特异性不强的原因可能是什么？...

结果特异性不强是指有杂带出现，背景深，还是指目的条带不显著？前两个是可能是膜没有封闭好、抗体特异性不好、IP的单抗、蛋白降解或修饰，后一个和抗体浓度、孵育时间、蛋白本身的量有关。
赞一下 回复此楼
生活总是有那么多门槛，一口气跨过去就好了。
7楼2015-12-09 21:22:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 MIMPI 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 5BDX0d0WFp7t 2026-09-15 4/200 2026-09-17 16:29 by 0ngsZVSCTS7z
[基金申请] 国社科系统bug了，是不是要放榜了？ +3 kynobel 2026-09-16 3/150 2026-09-17 16:11 by 接好运婷
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 vZfe6xYu34yj 2026-09-14 3/150 2026-09-17 15:29 by 0ngsZVSCTS7z
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 23jxep3nCNZb 2026-09-14 5/250 2026-09-17 13:29 by ObVzqQQh1rrE
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-17 12:39 by ObVzqQQh1rrE
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 4/200 2026-09-17 04:52 by k06BKNblrGRH
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 23jxep3nCNZb 2026-09-14 4/200 2026-09-17 04:04 by k06BKNblrGRH
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 23jxep3nCNZb 2026-09-14 3/150 2026-09-17 03:52 by k06BKNblrGRH
[公派出国] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +6 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 6/300 2026-09-17 02:38 by Tql5LQhh5rLK
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 7/350 2026-09-17 02:28 by Tql5LQhh5rLK
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 7/350 2026-09-17 02:02 by Tql5LQhh5rLK
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-16 17:12 by i3KBRD19ERkG
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 6/300 2026-09-16 16:00 by i3KBRD19ERkG
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +7 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 7/350 2026-09-16 14:36 by i3KBRD19ERkG
[考研] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 4/200 2026-09-16 06:36 by LH5NkK5Ud4bh
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 17:39 by CgyNCDVNhGVg
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-15 14:58 by CgyNCDVNhGVg
[教师之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 08:26 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 08:14 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-15 07:50 by C79jjtjAKjEn
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭