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郑炳义新虫 (小有名气)
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[求助]
AKTA pure 快速蛋白液相色谱
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小弟操作一段时间的 AKTA pure 快速蛋白液相色谱 有些疑惑 请各路大神指教指教啊 1.需要确定待分离样品的等电点PI吗？ 2.如何确定蛋白质的稳定性从而选定缓冲液和柱子？ 3.设置线性洗脱，当洗脱液到达100%时，会不会有洗脱不下来的蛋白质？ 4.结果分析，积分后该如何计算出该吸收峰的蛋白浓度？ 现在在实验室操作一直都是如下组合，不管什么待分离样品，都会有吸收峰，为什么呢？难道这个是万能组合，都不需要根据待测样品来确定缓冲液和柱子？ 缓冲液： 10uM NH4OAc溶液 PH=4.6 洗脱液：含1MNaCl的缓冲液 柱子：Monos 阳离子交换柱 操作系统：AKTA pure |
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