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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » PCold载体在BL21中完全不表达，怎么办？？
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1366791290

新虫 (初入文坛)

[求助] PCold载体在BL21中完全不表达，怎么办？？ 已有2人参与

目的蛋白分子量是68KD，重组PCold载体在BL21中不表达，说是目的基因里面有很多的稀有密码子，可以通过换其他的宿主菌实现表达吗？有没有人可推荐的？急求！！
还有关于宿主菌TB1和BL21的在克隆表达上有什么不同？本人刚开始做这方面的，急求大神们指点！！！
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1楼 2015-11-29 14:39:21
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biosci

捐助贵宾 (知名作家)
可以用rosseta菌株，补充稀有密码子

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2楼2015-11-29 17:14:13
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用TF试试，增强可溶性

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3楼2015-11-29 17:21:43
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1366791290

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by biosci at 2015-11-29 17:14:13
可以用rosseta菌株，补充稀有密码子

多谢大神指点，但是目前我们实验室没有这种宿主菌，请问大神能不能借给我们一点，多谢多谢！

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4楼2015-11-29 20:25:41
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1366791290

新虫 (初入文坛)
内容已删除
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5楼2015-11-29 22:04:07
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总有二狗咬朕

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
关于宿主菌的选择，楼主可以看http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=9692512&fpage=1&target=blank，我的评论~
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我好累，承受这个年纪不该有的帅！
6楼2015-12-01 15:46:22
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周梦琳347

新虫 (初入文坛)
你好，请问一下你这儿有没有pCold 1 这个载体啊？能否借用一点啊？可以有偿，O(∩_∩)O谢谢
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回忆的大树，让生命有厚度
7楼2016-06-18 21:41:26
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青萍之沫

新虫 (职业作家)
我有pCold1

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8楼2018-10-05 14:48:55
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0117

新虫 (初入文坛)
你好，后来换表达宿主后，你的蛋白表达了吗，我跟您差不多一样情况。
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9楼2019-06-14 14:29:14
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