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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 请教一下关于内标法HPLC的问题，非常感谢
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superwheat

银虫 (正式写手)

[交流] 请教一下关于内标法HPLC的问题，非常感谢

需要做组织内的药物浓度测定，发现通常别人都是先把组织匀浆，然后再往匀浆液里面加入内标物质。
和先往组织样品加入内标然后匀浆相比，匀浆后加内标有什么好处呢？匀浆过程不会损失样品吗？
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1楼 2008-09-18 15:09:10
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shinebss

金虫 (小有名气)
应该是先把组织匀浆，再加浸提液，然后再往浸提液里加内标吧？？？
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^^^^^β^^^^^ s s
2楼2008-09-18 16:46:18
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nhuzwj

金虫 (小有名气)
匀浆过程会不会损失样品看具体方法了，少量的损失一般都是存在的
匀浆后加内标的好处是：加入的内标物的量就能准确的知道了，起到定量的作用。但如果在匀浆前加入内标物，则在匀浆过程中可能造成内标物损失，导致无法准确定量了
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3楼2008-09-18 18:38:34
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superwheat

银虫 (正式写手)
非常感谢。
还有个问题，匀浆的时候要加入一定体积的裂解液，那最后计算稀释倍数的时候，是不是就把组织的密度看作1？
比如0.1g组织+0.5ml裂解液，那总体积是不是就当作0.6ml?
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4楼2008-09-18 20:21:55
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evilzhou

金虫 (小有名气)
首先要明确加内标的用途！ 当然就是为了校正你试验过程中的各种误差了
所以原则上，内标是要在试验开始的时候就加进去
二楼的可以说就不明白什么是内标法
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5楼2008-09-18 20:21:55
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superwheat

银虫 (正式写手)
其实我最初的想法也和你一样，不过关于这个问题我问了几个常做HPLC的人，似乎都是匀浆后加的意见占多数，但也说不清楚为什么。
我也查了几篇文献，包括英文文献和别人的毕业论文，也都是在匀浆后的内标，所以我有点想知道为什么
引用回帖:
Originally posted by evilzhou at 2008-9-18 20:21:
首先要明确加内标的用途！ 当然就是为了校正你试验过程中的各种误差了
所以原则上，内标是要在试验开始的时候就加进去
二楼的可以说就不明白什么是内标法

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6楼2008-09-20 14:20:00
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jinshanshi88

木虫 (著名写手)
应该是匀浆后加，匀浆前加应该有损失，加入的量就不准确了，对于定量不好。因为你的标准曲线是直接用对照品做的，可没有组织
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7楼2008-09-20 16:06:30
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lassa

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by evilzhou at 2008-9-18 20:21:
首先要明确加内标的用途！ 当然就是为了校正你试验过程中的各种误差了
所以原则上，内标是要在试验开始的时候就加进去
二楼的可以说就不明白什么是内标法

内标主要是校正机器误差的
找分析化学的课本看就知道了
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8楼2008-09-21 09:50:45
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