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superwheat

银虫 (正式写手)

[交流] 请教一下关于内标法HPLC的问题,非常感谢

需要做组织内的药物浓度测定,发现通常别人都是先把组织匀浆,然后再往匀浆液里面加入内标物质。
和先往组织样品加入内标然后匀浆相比,匀浆后加内标有什么好处呢?匀浆过程不会损失样品吗?
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shinebss

金虫 (小有名气)

应该是先把组织匀浆,再加浸提液,然后再往浸提液里加内标吧???
^^^^^β^^^^^ s s
2楼2008-09-18 16:46:18
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nhuzwj

金虫 (小有名气)

匀浆过程会不会损失样品看具体方法了,少量的损失一般都是存在的
匀浆后加内标的好处是:加入的内标物的量就能准确的知道了,起到定量的作用。但如果在匀浆前加入内标物,则在匀浆过程中可能造成内标物损失,导致无法准确定量了
3楼2008-09-18 18:38:34
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superwheat

银虫 (正式写手)

非常感谢。
还有个问题,匀浆的时候要加入一定体积的裂解液,那最后计算稀释倍数的时候,是不是就把组织的密度看作1?
比如0.1g组织+0.5ml裂解液,那总体积是不是就当作0.6ml?
4楼2008-09-18 20:21:55
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evilzhou

金虫 (小有名气)

首先要明确加内标的用途! 当然就是为了校正你试验过程中的各种误差了
所以原则上,内标是要在试验开始的时候就加进去
二楼的可以说就不明白什么是内标法
5楼2008-09-18 20:21:55
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superwheat

银虫 (正式写手)

其实我最初的想法也和你一样,不过关于这个问题我问了几个常做HPLC的人,似乎都是匀浆后加的意见占多数,但也说不清楚为什么。
我也查了几篇文献,包括英文文献和别人的毕业论文,也都是在匀浆后的内标,所以我有点想知道为什么
引用回帖:
Originally posted by evilzhou at 2008-9-18 20:21:
首先要明确加内标的用途! 当然就是为了校正你试验过程中的各种误差了
所以原则上,内标是要在试验开始的时候就加进去
二楼的可以说就不明白什么是内标法

6楼2008-09-20 14:20:00
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jinshanshi88

木虫 (著名写手)

应该是匀浆后加,匀浆前加应该有损失,加入的量就不准确了,对于定量不好。因为你的标准曲线是直接用对照品做的,可没有组织
7楼2008-09-20 16:06:30
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lassa

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by evilzhou at 2008-9-18 20:21:
首先要明确加内标的用途! 当然就是为了校正你试验过程中的各种误差了
所以原则上,内标是要在试验开始的时候就加进去
二楼的可以说就不明白什么是内标法

内标主要是校正机器误差的
找分析化学的课本看就知道了
8楼2008-09-21 09:50:45
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